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人血管平滑肌細胞的貼壁生長和懸浮生長細胞處理方法

閱讀:1545      發(fā)布時間:2021-1-26
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   人血管平滑肌細胞的貼壁生長和懸浮生長細胞處理方法:
  貼壁生長的細胞:
  1,、貼壁生長的細胞用T25細胞培養(yǎng)瓶發(fā)貨,,收到細胞后,,拆開自封袋,不拆封口膜,,表面噴75%酒精消毒。
 
  2,、消毒后用顯微鏡觀察細胞狀態(tài),,并拍下細胞照片。
 
  3,、將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,,平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境。
 
  4,、平衡后將T25瓶中培養(yǎng)基吸出用離心管裝好備用,。
 
  5、如細胞密度高于80%,,可以直接消化傳代,,相反則加入5-6mL培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。
 
  懸浮生長的細胞:
  1,、懸浮細胞發(fā)貨復(fù)蘇后用離心管發(fā)貨,,拆開包裝離心管的自封袋,不拆封口膜,,表面噴75%酒精消毒,。
 
  2、然后用顯微鏡觀察細胞狀態(tài),。
 
  3,、將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上。
 
  4,、平衡完成后,,離心收集細胞,棄上清,。
 
  5,、用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng),。
 
  人血管平滑肌細胞的培養(yǎng)步驟:
  1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
 
  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。

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