人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)elisa檢測(cè)試劑盒反應(yīng)步驟:
(1)嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min,。
(2)加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),,要分批操作,。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*,。
(3)封板溫育時(shí),,各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),,產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn),。
(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿各孔,,洗板針暢通,,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,,ELISA試劑盒這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn),。
(5)合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng),。
(6)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干,。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用,。
(8)加樣時(shí)保持顯色劑不外流,;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械,。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡,。
(9)應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔,整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸,。以上的措施可以使“花板"降至低限度,。ELISA試劑盒豚鼠從而提高檢測(cè)的特異性。并得到更準(zhǔn)確,、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
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