維生素CELISA試劑盒進(jìn)行各項實驗條件的選擇包括:
(1)固相載體的選擇:不管何種載體,,在使用前均可進(jìn)行篩選,,用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),,然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(3)ELISA試劑盒包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,吸附溫度,,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,。
一、準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,,大于等于0.9900,。
二、靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 ng/mL,。
三,、特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
四,、重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%。
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