魚骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒注意事項:
1.邊緣效應(yīng) 使用96孔板的ELISA測定中,,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)",即外周孔顯色較中心孔深,。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所,。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體,在實(shí)驗室的常規(guī)ELISA測定中,,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,,板也升溫時,在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度,。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時,,將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)",,并且可提高測定的重復(fù)性,。
2.加樣在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟,。注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡,。加樣太快,,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),,易導(dǎo)致非特異吸附,。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異,。所以,,有時候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致,。
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