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豬雙肽酶酶聯(lián)免疫分析操作步驟

閱讀:1456      發(fā)布時間:2020-1-8
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豬雙肽酶(dipeptidase)酶聯(lián)免疫分析操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同),、標準孔、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外。 
7.溫育:操作同3,。
8.洗滌:操作同5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色10分鐘。
10.終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

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