原代細(xì)胞是剛從體內(nèi)取出的組織中獲得的細(xì)胞,，要求不嚴(yán)格的話，十代以內(nèi)都算原代細(xì)胞,。因為離體不久,，所以其對外界的刺激的反應(yīng)更接近體內(nèi)的實際情況，這也是為什么藥篩要用原代細(xì)胞,，或者起碼要有原代細(xì)胞的驗證,。
凍存的原代細(xì)胞該如何開始培養(yǎng),？
(1) 將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,，注意保護手和眼睛,。
(2) 將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉(zhuǎn),，直到管內(nèi)物體*融化,。
(3) 將凍存管立即從水浴中拿出，擦干,，轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境,。
(4) 用70％的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精,。
(5) 打開蓋子,，注意手指不要碰到里面的螺紋（注意，由于凍存管有負(fù)壓,，開蓋時可能會有少量溢出,，這是正常現(xiàn)象）,。
(6) 用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶,。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個細(xì)胞。
(7) 蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻,。若需要氣體交換可打開蓋子。
(8) 將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中,。
(9) 放入培養(yǎng)箱后第6-16小時更換一次培養(yǎng)基,，以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。
原代細(xì)胞的組織塊培養(yǎng)法：
1）組織塊接種后的前3天,，在觀察和移動的過程中,，注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動和振動,，否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起,。
2）加入的培養(yǎng)液不宜過多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來,。
3）當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞,，它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會影響原代細(xì)胞的生長。
4）為促進組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上,，可以在種植前先將膠原薄層涂在培養(yǎng)瓶底壁上,。
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