在酶聯(lián)免疫試劑盒實驗中,,靈敏度高是其主要優(yōu)點之一。而這其實也是和檢測樣本有些關(guān)聯(lián)的,,如果待 測樣本中目標蛋白的濃度比較高,,則對靈敏度要求相對小一些。如果待測樣本中目標蛋白的濃度比較低,,則必須考慮靈敏度的問題,。
試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準確的,低于這個值因為與曲線是個“S”型結(jié)構(gòu)有關(guān),,所以結(jié)果是有偏差的,,是一種估算。再加上實驗誤差,,所以達不到理想的效果,。建議選擇試劑盒時,應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,,而不是試劑盒上寫的靈敏度,。
一般說來,,診斷試劑的檢測范圍以ng/ml計。而常見的科研試劑盒中的樣本中的目標蛋白,,范圍可隨樣本的類型而變化,。所以實驗前應(yīng)通過文獻和預(yù)實驗的方法確定樣本是否在所購試劑盒的范圍內(nèi),如果不在檢測范圍內(nèi),,分兩種情況對待,。
1. 如果樣本中目標蛋白太低,需找相應(yīng)靈敏度更高的試劑盒來檢測或濃縮樣本,;
2. 如果樣本中目標蛋白太高,,則需要進一步稀釋后進行檢測
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