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 ELISA試劑盒測定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）,、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液,、糞便）等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定（如血清,、尿液）,，有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。
  大部分ELISA試劑盒檢測均以血清為標(biāo)本,。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固,、xue塊收縮后即可取得。除特殊情況外,，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測標(biāo)本,。
    在ELISA試劑盒中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,，應(yīng)注意避免溶血,，紅細(xì)胞溶解時(shí)會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA試劑盒測定中,，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色,。
   血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。如有細(xì)菌污染,，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久,，其中的可發(fā)生聚合,，在間接法ELISA試劑盒中可使本底加深。一般說來,，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,，超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均,，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡,，可上下顛倒混和,，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾,，澄清后再檢測。
   反復(fù)凍融會使抗體效價(jià)跌落,，所以測抗體的血清標(biāo)本如,，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作,，也可加入適當(dāng)防腐劑,。加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中,。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣,。有此測定（如間接法ELISA試劑盒）需用稀釋的血清,，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,，再在其中加入血清標(biāo)本,，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器,，使加液過程迅速完成,。