1加樣
對(duì)于間接載脂蛋白elisa檢測(cè)試劑盒標(biāo)本一般都要進(jìn)行稀釋,,如果加樣不準(zhǔn)就會(huì)造成誤差,尤其當(dāng)稀釋倍數(shù)大時(shí),,很小的誤差,,會(huì)導(dǎo)致較大的相對(duì)誤差,使陰性(或弱陽(yáng)性)標(biāo)本呈陽(yáng)性(或陰性),。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,,不可產(chǎn)生氣泡,。目前,大部分血站都已使用全自動(dòng)酶免加樣系統(tǒng)處理標(biāo)本,,可較好地避免以上誤差
2洗滌
在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復(fù)結(jié)果的關(guān)健一步,,應(yīng)引起操作者重視。無(wú)論是手工操作還是機(jī)器操作,,得出不正確的結(jié)果常與不正確的洗滌有關(guān),,ELISA就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的,。通過(guò)洗滌以消除殘留在板孔中沒(méi)能與固體抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
3 溫育
每種試劑都有其*反應(yīng)模式,,其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素。因孵育溫度高,,反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng),,會(huì)造成整板本底高,陽(yáng)性率高,。溫育一般用濕盒或水浴 ,,反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,,為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋。
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