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皮質(zhì)醇elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)建議事項(xiàng)

閱讀:1135      發(fā)布時(shí)間:2018-9-18
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皮質(zhì)醇elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)不建議固定組織24小時(shí)以上,因?yàn)楣潭ㄟ^度可能導(dǎo)致抗原的遮蔽,。組織在固定后可轉(zhuǎn)移至酒精中,,直至包埋過程。
      因?yàn)槭炁c水是不混溶的,,ELISA試劑盒所以組織在加入熔化的固體石蠟前必須脫水,。脫水是通過浸潤在濃度遞增的酒精中而實(shí)現(xiàn)的。這種方法逐步改變疏水性,,讓細(xì)胞傷害zui小化,。脫水之后,組織與二甲苯共同孵育,,以去除任何殘留的酒精,。
        仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
      仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。固定可通過灌注或解剖后立即浸潤來實(shí)現(xiàn),,一般需要4-24小時(shí),。

石蠟一般加熱到60?C進(jìn)行包埋,,隨后經(jīng)過一夜硬化。
血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)該再次離心。
尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。
     ELISA試劑盒利用切片機(jī)用鋒利的刀片將組織切成超薄的切片。切片在顯微鏡載玻片上干燥,,并長時(shí)間室溫儲(chǔ)存,。組織切片在開始IHC/ICC步驟之前必須再水化。
     研究人員發(fā)現(xiàn),,當(dāng)實(shí)驗(yàn)鼠的食物中含有較多糖分時(shí),,由此產(chǎn)生的葡萄糖會(huì)妨礙這種細(xì)胞的功能,使其分泌下丘腦泌素的量減少,,從而讓實(shí)驗(yàn)鼠易困,。

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