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（1）亮發(fā)光桿菌取河沙加入10％稀鹽酸,，加熱煮沸30分鐘，以去除其中的有機質(zhì),。 
    （2）倒去酸水,，用自來水沖洗至中性
    （3）烘干，用40目篩子過篩,，以去掉粗顆粒,，備用。
    （4）另取非耕作層的不含腐植質(zhì)的瘦黃土或紅土,，加自來水浸泡洗滌數(shù)次,，直至中性。 
    （5）烘干,，碾碎,，通過100目篩子過篩，以去除粗顆粒
    （6）按一份黃土,、三份沙的比例（或根據(jù)需要而用其他比例,，甚至可全部用沙或全部用土）摻合均勻，裝入10×100mm的小試管或安瓿管中,，每管裝1g左右,，塞上棉塞，進行滅菌，烘干,。 
    （7）抽樣進行無菌檢查,，每10支沙土管抽一支，將沙土倒入肉湯培養(yǎng)基中,，37℃培養(yǎng)48小時,，若仍有雜菌，則需全部重新滅菌,，再作無菌試驗,，直至證明無菌，方可備用,。 
    （8）選擇培養(yǎng)成熟的（一般指孢子層生長豐滿的,，營養(yǎng)細胞用此法效果不好）優(yōu)良菌種，以無菌水洗下,，制成孢子懸液,。 
    （9）于每支沙土管中加入約0．5ml（一般以剛剛使沙土潤濕為宜）孢子懸液，以接種針拌勻,。
    （10）放入真空干燥器內(nèi),，用真空泵抽干水分，抽干時間越短越好,，務使在12小時內(nèi)抽干,。 
    （11）每10支抽取一支，用接種環(huán)取出少數(shù)沙粒,，接種于斜面培養(yǎng)基上,，進行培養(yǎng)，觀察生長情況和有無雜菌生長,，如出現(xiàn)雜菌或菌落數(shù)很少或根本不長,，則說明制作的沙土管有問題，尚須進一步抽樣檢查,。 
    （12）若經(jīng)檢查沒有問題,，用火焰熔封管口，放冰箱或室內(nèi)干燥處保存,。每半年檢查一次活力和雜菌情況,。 
    （13）需要使用亮發(fā)光桿菌，復活培養(yǎng)時,，取沙土少許移入液體培養(yǎng)基內(nèi),，置溫箱中培養(yǎng)。 
    此法多用于能產(chǎn)生孢子的微生物如霉菌,、放線菌,，因此在抗生素工業(yè)中應用廣,，效果亦好，可保存2年左右,，但應用于營養(yǎng)細胞效果不佳,。

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