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1,、費氏弧菌發(fā)光桿菌培養(yǎng)基的配制

1）、Camp-BAP固體培養(yǎng)基的配制：
稱取8.92g培養(yǎng)基,，溶于200ml蒸餾水中高壓滅菌,，待冷卻至55°C左右加入200ul添加劑A,、200ul添加劑B和10ml脫纖維裂解羊血，充分搖勻后倒平板,。(添加劑A和B為購買附帶),。
2）、Skirrow固體培養(yǎng)基的配制：
稱取8.5g培養(yǎng)基,，溶于200ml蒸餾水中高壓滅菌,，待冷卻至55°C左右加入2ml FBP原液和10ml脫纖維裂解羊血，充分搖勻后倒平板,。
FBP原液配置：
分別稱取0.5g焦亞硫酸鈉,、0.5g丙酮酸鈉和0.5g硫酸亞鐵，溶于20ml蒸餾水中,，濾膜過濾除菌,，放置4°C冰箱可保存一周。
3）,、布氏肉湯增菌液的配制：
稱取28.1g布氏肉湯粉末,，溶解于1000ml蒸餾水中高壓滅菌，冷卻后備用,。

2、增菌培養(yǎng)

費氏弧菌發(fā)光桿菌將新鮮食品,，如雞肉,，減碎，取5g置于50ml離心管中,，加入布氏肉湯至液面覆蓋雞肉樣品,，擰緊離心管，先在37°C下預增菌4小時,，在加入100 ul頭孢哌酮（30mg/ml）,，并顛倒混勻，放置在微需氧培養(yǎng)箱中42°C培養(yǎng)48小時,。

3,、分離純化

用接種環(huán)沾取增菌液劃線于Skirrow血平板上，在平板上挑取不溶血,、灰色,、有光澤、且邊緣整齊發(fā)亮的菌落在Camp-BAP平板上純化,，挑取扁平,、灰色、像水滴樣菌落多次純化后保存,。

4,、菌株培養(yǎng)

將純化的彎曲桿菌單菌落接種到Skirrow血平板上,，放置在42°C的微需氧環(huán)境下培養(yǎng)48小時，觀察細菌生長狀態(tài),。微需氧條件的創(chuàng)造可用微需氧產氣袋和密閉培養(yǎng)罐,，也可以用微需氧培養(yǎng)箱（三氣培養(yǎng)箱）培養(yǎng)。

5,、菌株保存方法

挑取單克隆菌株在Skirrow固體培養(yǎng)基上平板劃線,，放置在42°C的微需氧環(huán)境下培養(yǎng)48小時，用滅菌棉簽從平板上刮下長出的菌落,，懸浮在50%甘油的布氏肉湯保種液中,，置于-80°C超低溫保存。在-20°C冰箱中保存效果較差,，存放一周后細菌復蘇率即顯著下降,。此外，費氏弧菌發(fā)光桿菌保存菌株需要每隔一年重新活化保存一次,。