免疫球蛋白抗血清制備方法
此法用于制備間接法抗抗體,。因抗原為可溶性,，故多需加佐劑。
（1）淋巴結(jié)注射法
1）選擇體重2～3Kg的健康雄性家兔（ 2只以上）,，編號(hào),；
2）在家兔兩后腳掌共注射活卡介苗，50mg（約0.6mL．每只足庶部皮下0.1mL,，皮內(nèi)0.2mL）,。7～10d后，鼠或國(guó)窩處淋巴結(jié)腫大如黃豆或蠶豆大??；
3）用二指固定腫大之淋巴結(jié),，兩側(cè)淋巴結(jié)各注射加有*佐劑的抗原o．5mL，共1mL,。事先將抗原稀釋為 5～10mg/ml,，在免疫前一日加入青、鏈霉素,，使青,、鏈霉素的濃度分別為1000U/mL和1000mg／mL。4℃,，次日取出與佐劑混合成乳劑,。許多單位用兩個(gè)注射器分別吸取佐劑與抗原，中間用細(xì)膠管連接,，相互推進(jìn)若干次,，達(dá)到乳化目的；
4）10～14d后,，于兩側(cè)淋巴結(jié)各注射加有*佐劑的抗原0.25～0.5mL（這一次也可以省略）,；
5）7d后，于兩側(cè)淋巴結(jié)各注射加有不*佐劑的抗原0.25～0.5mL,；
6）試血：第三次免疫后7～10d,，耳靜脈取少量血，分離血清,，用雙擴(kuò)散法,，中間孔加抗原（1mg/mL），周圍孔加不同稀釋度的待檢抗血清,，37℃,、 24h，觀察結(jié)果,，效價(jià)在1︰16以上,，或者中間孔加抗血清，周圍孔加不同稀釋倍數(shù)的抗原,。效價(jià)達(dá)4000倍以上即可應(yīng)用,；
7）放血：效價(jià)合格后即可放血,。放血前停食12h,。動(dòng)物仰臥固定，頸部剪毛消毒,，切開(kāi)皮膚lOcm,，找到頸動(dòng)脈，將頸動(dòng)脈和迷走神經(jīng)剝離,。選擇血管中段,，用兩止血鉗夾?。s 5cm），切開(kāi),，放血（2500g重家兔可放血lOOmL）,；
8）分離血清：血液放于大試管、平皿或三角瓶中,，凝固后,，用鉑耳或無(wú)菌滴管沿邊緣剝離，先故37122h,，再放4℃,，使血清充分析出。離心沉淀,，鑒定合格,，冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
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