如何靈活的挑選ELISA測試盒
怎樣靈活應(yīng)用ELISA這個檢測方法以及怎樣去挑選ELISA測試盒,。ELISA這個方法的原理,大家都很明白,,網(wǎng)上的資料很多??烧嬲闷饋淼臅r候,,偶然間就會有點犯糊涂,我談一下自己的理解,。
1,、有些客戶會用OVA(卵清卵白)做一些哮喘,過敏性腸炎的模型,,然后會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清內(nèi)里IgG,,IgE等指標。
2,、NO的檢測,,一般都是采用經(jīng)典的Greiss法,如今市場上竟然有NO ELISA試劑盒,,真是徹夜未眠也搞不明白,。另外還有做氧化應(yīng)激指標MDA的檢測,我推薦ELISA測試盒,。
3,、ELISA檢測方法簡單,靈敏度高,,我個人認為ELISA檢測血清或者培養(yǎng)上清的細胞因子,、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測,;病原體抗原的定性與定量,;評估自己制備的血清抗體的效價等。很多客戶有個誤區(qū),,拿來一個指標就想當然地嘗試用ELISA去檢測,,我還是建議多動腦,,該檢測活性的檢測活性,該做western的做western,。
4,、對付一些小分子的檢測,例如:前線腺素,、糖皮質(zhì)激素的檢測,,我的理解是要用競爭法ELISA去檢測,也要購買采用這個方法的盒試劑盒,。ELISA試劑盒一般細胞因子的檢測,,都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測,由于因子分子量比力大,,一般10幾個KD左右,,很容易找到兩個或多個抗原表位。
而小分子很難找到兩個不通的表位,,也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結(jié)合小分子并固相化,。解決方案便是酶標板上包被二抗,每個孔加入一定量的酶標的小分子,,然后加樣品,,再加不帶標志的檢測抗體,顯色底物,。樣品的目標小分子的含量越高,,吸光度越低。
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