 | 華泰和合（北京）商貿(mào)有限公司 |
會(huì)員.png)
11
13661219353
當(dāng)前位置：首頁>>技術(shù)中心>>技術(shù)文章>>微生物檢測基礎(chǔ)知識(shí)匯總
在線溝通：
衡福金 （經(jīng)理）
- 電話：
- 010-53676895
- 手機(jī)：
- 13661219353
- 傳真：
- 010-83488673
- 聯(lián)系我時(shí),，
- 告知來自化工儀器網(wǎng)
- 個(gè)性化：
- www.bio-hthh.com
- 手機(jī)站：
- m.bio-hthh.com
- 商鋪網(wǎng)址：
- http://sorrent.com.cn/st306145/
- 公司網(wǎng)站：
- www.bio-hthh.com
微生物檢測基礎(chǔ)知識(shí)匯總
閱讀：2427發(fā)布時(shí)間：2020-9-17
接種
將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過程叫做接種,。
接種和分離工具
1.接種針2.接種環(huán)3.接種鉤4.玻璃涂棒5.接種圈6.接種鋤7.小解剖刀
常用的接種方法有以下幾種：
1,、劃線接種
這是常用的接種方法。即在固體培養(yǎng)基表面作來回直線形的移動(dòng),，就可達(dá)到接種的作用,。常用的接種工具有接種環(huán)，接種針等,。在斜面接種和平板劃線中就常用此法,。
2、三點(diǎn)接種
在研究霉菌形態(tài)時(shí)常用此法,。此法即把少量的微生物接種在平板表面上,，成等邊三角形的三點(diǎn)，讓它各自獨(dú)立形成菌落后,，來觀察,、研究它們的形態(tài)。除三點(diǎn)外,，也有一點(diǎn)或多點(diǎn)進(jìn)行接種的,。
3、穿刺接種
在保藏厭氧菌種或研究微生物的動(dòng)力時(shí)常采用此法,。做穿刺接種時(shí),，用的接種工具是接種針。用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基,。它的做法是：用接種針蘸取少量的菌種,，沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺，如某細(xì)菌具有鞭毛而能運(yùn)動(dòng),，則在穿刺線周圍能夠生長,。
4、澆混接種
該法是將待接的微生物先放入培養(yǎng)皿中,，然后再倒入冷卻至45°c左右的固體培養(yǎng)基,，迅速輕輕搖勻，這樣菌液就達(dá)到稀釋的目的,。待平板凝固之后,，置合適溫度下培養(yǎng)，就可長出單個(gè)的微生物菌落,。
5,、涂布接種
與澆混接種略有不同，就是先倒好平板,，讓其凝固,，然后再將菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作來回左右的涂布，讓菌液均勻分布,，就可長出單個(gè)的微生物的菌落,。
6、液體接種
從固體培養(yǎng)基中將菌洗下,，倒入液體培養(yǎng)基中,，或者從液體培養(yǎng)物中，用移液管將菌液接至液體培養(yǎng)基中,，或從液體培養(yǎng)物中將菌液移至固體培養(yǎng)基中，都可稱為液體接種,。
7,、注射接種
該法是用注射的方法將待接的微生物轉(zhuǎn)接至活的生物體內(nèi)，如人或其它動(dòng)物中,，常見的疫苗預(yù)防接種,，就是用注射接種，接入人體,，來預(yù)防某些疾病,。
8、活體接種
活體接種是專門用于培養(yǎng)病毒或其它病原微生物的一種方法,，因?yàn)椴《颈仨毥臃N于活的生物體內(nèi)才能生長繁殖,。所用的活體可以是整個(gè)動(dòng)物；也可以是某個(gè)離體活組織,，例如猴腎等,；也可以是發(fā)育的雞胚。接種的方式是注射,，也可以是拌料喂養(yǎng),。
注：有所接種必須無菌操作
培養(yǎng)基經(jīng)高壓滅菌后，用經(jīng)過滅菌的工具(如接種針和吸管等)在無菌條件下接種含菌材料(如樣品,、菌苔或菌懸液等)于培養(yǎng)基上,，這個(gè)過程叫做無菌接種操作。在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中的各種接種必須是無菌操作,。
(1)接種滅菌(2)開啟棉塞(3)管口滅菌(4)挑起菌苔(5)接種(6)塞好棉塞,。
分離純化
含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物(mixedculture)。如果在一個(gè)菌落中所有細(xì)胞均來自于一個(gè)親代細(xì)胞,，那么這個(gè)菌落稱為純培養(yǎng)(pureculture),。在進(jìn)行菌種鑒定時(shí)，所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物,。得到純培養(yǎng)的過程稱為分離純化,，方法有許多種。
1、傾注平板法
首先把微生物懸液通過一系列稀釋,，取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40-50°左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合,，然后把這混合液傾注到無菌的培養(yǎng)皿中，待凝固之后,，把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng),。單一細(xì)胞經(jīng)過多次增殖后形成一個(gè)菌落，取單個(gè)菌落制成懸液,，重復(fù)上述步驟數(shù)次,，便可得到純培養(yǎng)物。
2,、涂布平板法
首先把微生物懸液通過適當(dāng)?shù)南♂?，取一定量的稀釋液放在無菌的已經(jīng)凝固的營養(yǎng)瓊脂平板上，然后用無菌的玻璃刮刀把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上,，經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個(gè)菌落,。
3、平板劃線法
簡單的分離微生物的方法是平板劃線法,。用無菌的接種環(huán)取培養(yǎng)物少許在平板上進(jìn)行劃線,。劃線的方法很多，常見的比較容易出現(xiàn)單個(gè)菌落的劃線方法有斜線法,、曲線法,、方格法、放射法,、四格法等,。當(dāng)接種環(huán)在培養(yǎng)基表面上往后移動(dòng)時(shí)，接種環(huán)上的菌液逐漸稀釋,，后在所劃的線上分散著單個(gè)細(xì)胞,，經(jīng)培養(yǎng)，每一個(gè)細(xì)胞長成一個(gè)菌落,。
4,、富集培養(yǎng)法
富集培養(yǎng)法的方法和原理非常簡單。我們可以創(chuàng)造一些條件只讓所需的微生物生長,，在這些條件下,，所需要的微生物能有效地與其他微生物進(jìn)行競爭，在生長能力方面遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過其他微生物,。如果要分離一些專性寄生菌,，就必須把樣品接種到相應(yīng)敏感宿主細(xì)胞群體中，使其大量生長,。通過多次重復(fù)移種便可以得到純的寄生菌,。
5,、厭氧法
在實(shí)驗(yàn)室中，為了分離某些厭氧菌,，可以利用裝有原培養(yǎng)基的試管作為培養(yǎng)容器,，把這支試管放在沸水浴中加熱數(shù)分鐘，以便逐出培養(yǎng)基中的溶解氧,。然后快速冷卻,，并進(jìn)行接種。接種后,，加入無菌的石蠟于培養(yǎng)基表面,，使培養(yǎng)基與空氣隔絕。另一種方法是,，在接種后,，利用N2或CO2取代培養(yǎng)基中的氣體，然后在火焰上把試管口密封,。有時(shí)為了更有效地分離某些厭氧菌，可以把所分離的樣品接種于培養(yǎng)基上,，然后再把培養(yǎng)皿放在*密封的厭氧培養(yǎng)裝置中,。
6、單細(xì)胞(或單孢子)分離法
是采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個(gè)細(xì)胞或單個(gè)個(gè)體進(jìn)行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng),。較大的微生物,，可采用毛細(xì)管提取單個(gè)個(gè)體。個(gè)體相對較小的微生物,，需采用顯微操作儀,，在顯微鏡下用毛細(xì)管或顯微針、鉤,、環(huán)等挑取單個(gè)微生物細(xì)胞或孢子以獲得純培養(yǎng),。單細(xì)胞分離法對操作技術(shù)有比較高的要求。
培養(yǎng)
1,、根據(jù)培養(yǎng)時(shí)是否需要氧氣,，可分為好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)兩大類。
好氧培養(yǎng)：也稱“好氣培養(yǎng)”,。就是說這種微生物在培養(yǎng)時(shí),，需要有氧氣加入，否則就不能生長良好,。在實(shí)驗(yàn)室中,，斜面培養(yǎng)是通過棉花塞從外界獲得無菌的空氣。三角燒瓶液體培養(yǎng)多數(shù)是通過搖床振蕩,，使外界的空氣*地進(jìn)入瓶中,。
厭氧培養(yǎng)：也稱“厭氣培養(yǎng)”,。這類微生物在培養(yǎng)時(shí)，不需要氧氣參加,。在厭氧微生物的培養(yǎng)過程中,，重要的一點(diǎn)就是要除去培養(yǎng)基中的氧氣。
2,、根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài),，可分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)兩大類。
固質(zhì)培養(yǎng)：是將菌種接至疏松而富有營養(yǎng)的固體培養(yǎng)基中,，在合適的條件下進(jìn)行微生物培養(yǎng)的方法,。
液體培養(yǎng)：在實(shí)驗(yàn)中，通過液體培養(yǎng)可以使微生物迅速繁殖,，獲得大量的培養(yǎng)物,，在一定條件下，還是微生物選擇增菌的有效方法,。
華泰和合（北京）商貿(mào)有限公司主營產(chǎn)品：TW液氮罐,美國MVE液氮罐,美國PCR儀,滲透壓儀廠家,微生物檢測儀價(jià)格
化工儀器網(wǎng) 設(shè)計(jì)制作,，未經(jīng)允許翻錄必究.Copyright(C) http://sorrent.com.cn, All rights reserved.
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性,、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),，化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。 溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量,。