色譜柱的簡(jiǎn)介
色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類,。多為金屬或玻璃制作,。有直管形、盤管形,、U形管等形狀,。液相色譜通常均采用填充柱。
色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,，以及色譜柱的制備和操作條件,。
色譜是一種分離分析手段，分離是核心,，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟,。對(duì)色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,，分析速度快等,。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁,、有機(jī)聚合物微球（包括離子交換樹脂）,、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等,，柱效理論值可達(dá)5~16萬(wàn)/米,。對(duì)于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效；對(duì)于同系物分析,，只要500即可,；對(duì)于較難分離物質(zhì)對(duì)則可采用高達(dá)2萬(wàn)的柱子,，因此一般10~30cm左右的柱長(zhǎng)就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要,。
柱效受柱內(nèi)外因素影響，為使色譜柱達(dá)到*效率,，除柱外死體積要小外,，還要有合理的柱結(jié)構(gòu)（盡可能減少填充床以外的死體積）及裝填技術(shù)。即使的裝填技術(shù),，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,，靠近管壁的部位比較疏松，易產(chǎn)生溝流,，流速較快,，影響沖洗劑的流形，使譜帶加寬,，這就是管壁效應(yīng),。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍粒徑的厚度,。在一般的液相色譜系統(tǒng)中，柱外效應(yīng)對(duì)柱效的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng),。
色譜柱的構(gòu)造
色譜柱由柱管,、壓帽、卡套（密封環(huán)）,、篩板（濾片）,、接頭、螺絲等組成,。柱管多用不銹鋼制成,，壓力不高于70 kg/cm2時(shí)，也可采用厚壁玻璃或石英管,，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度,。為提高柱效，減小管壁效應(yīng),，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過(guò)拋光,。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度，其效果與拋光相同,。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,，用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,，是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,，孔徑0.2~20μm(5~10&μm)，取決于填料粒度,，目的是防止填料漏出,。
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類，尺寸規(guī)格也不同：①常規(guī)分析柱（常量柱）,，內(nèi)徑2~5mm（常用4.6mm,，國(guó)內(nèi)有4mm和5mm），柱長(zhǎng)10~30cm,；②窄徑柱（narrow bore,，又稱細(xì)管徑柱、半微柱semi-microcolumn）,，內(nèi)徑1~2mm,，柱長(zhǎng)10~20cm；③毛細(xì)管柱（又稱微柱microcolumn）,，內(nèi)徑0.2~0.5mm,；④半制備柱，內(nèi)徑>5mm；⑤實(shí)驗(yàn)室制備柱,，內(nèi)徑20~40mm,，柱長(zhǎng)10~30cm；⑥生產(chǎn)制備柱內(nèi)徑可達(dá)幾十厘米,。柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長(zhǎng),、填料粒徑和折合流速來(lái)確定，目的是為了避免管壁效應(yīng),。
