色譜柱的正確使用和維護十分重要,，稍有不慎就會降低柱效,、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,，需要注意下列問題,，以保證色譜柱的使用壽命。

1,、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動,。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料,，因此在調節(jié)流速時應該緩慢進行,，在閥進樣時閥的轉動不能過緩。

2,、應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中,，不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/span>

3、一般說來色譜柱不能反沖,，只有生產者指明該柱可以反沖時,，才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效,。

5,、經常用強溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內的雜質,。在進行清洗時,，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右,。下面列舉一些色譜柱的清洗溶劑及順序,，作為參考：

6、保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇,，柱接頭要擰緊,，防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間,。

7,、色譜柱使用過程中，如果壓力升高,，一種可能是燒結濾片被堵塞,，這時應更換濾片或將其取出進行清洗；另一種可能是大分子進入柱內,，使柱頭被污染,；如果柱效降低或色譜峰變形,，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大,。在后兩種情況發(fā)生時,，小心擰開柱接頭，用潔凈小鋼將柱頭填料取出1-2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內填料整平,。然后用適當溶劑濕潤的固定相(與柱內相同)填滿色譜柱,，壓平，再擰緊柱接頭,。這樣處理后柱效能得到改善,，但是很難恢復到新柱的水平。柱子失效通常是柱端部分,，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱(5-30mm),，可以起到保護、延長柱壽命的作用,。采用保護柱會損失一定的柱效,，這是值得的。通常色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上,。以硅膠為基質的填料,，只能在pH2-9范圍內使用。柱子使用一段時間后,，可能有一些吸附作用強的物質保留于柱頂,，特別是一些有色物質更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙稀?/span>

8、新的色譜柱在使用一段時間后柱頂填料可能塌陷,，使柱效下降,，這時也可補加填料使柱效恢復。每次工作完后,，用洗脫能力強的洗脫液沖洗,，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。當采用鹽緩沖溶液作流動相時,，使用完后應用無鹽流動相沖洗,。含鹵族元素(氟、氯,、溴)的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道,，不宜長期與之接觸。裝在HPLC儀上柱子如不經常使用,，應每隔4-5天開機沖洗15分鐘,。