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在色譜分析中,,好多色譜工作者通常會遇到偽峰的情況,,這種現(xiàn)象給正常色譜分析工作帶來了極大的干擾和影響。為解決這個問題,,首先必須弄清楚產(chǎn)生偽峰的原因,。 zui簡單的情形是所用的流動相在檢測波長下有吸收,而進在此波長下沒有吸收的溶劑,,在流動相中會出現(xiàn)“洞穴”,,通過色譜柱后出倒峰。
至于偽峰產(chǎn)生的原因,,可作如下解釋: 通常樣品(X)和流動相(M)間可能存在兩種作用——協(xié)同的吸著作用和競爭的吸著作用,。 假設(shè)樣品分子X不可檢測(無紫外吸收),流動相組分M可檢測,。M常是流動相中的雜質(zhì),,而X可能是溶解樣品溶劑中的雜質(zhì)或組分,或者是真實的樣品組分,。在協(xié)同吸著作用下,,如果tM小于tX,,流動相組分首先離開柱,,則M以倒峰先離開柱,接著X出正峰,;如果M和X的保留時間相反,,即tM大于tX,則X先離開柱出倒峰,,后流出的M出正峰,。 在離子對色譜中是以協(xié)同吸著作用為模式。在反相或正相色譜中是競爭而不是協(xié)同,,結(jié)果引起不同形式的偽峰:先出的偽峰是正峰,,后出的偽峰是倒峰。
一旦出現(xiàn)了偽峰,,可考慮用下面幾種思路予以糾正:
(1)用純試劑作流動相,。以高質(zhì)量的離子對試劑和緩沖物質(zhì)配制流動相,各類試劑加和起來應(yīng)產(chǎn)生zui小的偽峰效應(yīng),。
(2)用流動相溶解樣品,。以其它溶劑溶解樣品可能產(chǎn)生偽峰或?qū)е聜畏宓漠a(chǎn)生,,用流動相溶解樣品可減少產(chǎn)生偽峰的幾率。
(3)進zui小體積的樣品溶液,。偽峰常與樣品體積成比例,,離子對色譜的進樣體積要低于50微升。
(4)預(yù)處理好樣品,。樣品中的雜質(zhì)會促成偽峰的出現(xiàn),。
若用上述方法還不能去掉偽峰,則可視作為特殊的干擾峰來處理,,即作為特殊的組分,。改變色譜條件,使偽峰位置發(fā)生變化,,避開被干擾的峰,。
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