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分光光度計對土壤*磷的測定
磷存在與人體所有細(xì)胞中,，是維持骨骼和牙齒的必要物質(zhì)，幾乎參與所有生理上的化學(xué)反應(yīng)。磷還是使心臟有規(guī)律地跳動,、維持腎臟正常機能和傳達(dá)神經(jīng)刺激的重要物質(zhì),。
一、前沿掌握比色法測定土壤*磷的方法,，了解土壤中磷素形態(tài)及其土壤供磷能力與土壤*磷的關(guān)系,。掌握土壤*磷的浸提，浸提液的處理,，標(biāo)準(zhǔn)曲線制作,，顯色，比色,，計算,。
二、內(nèi)容與原理酸性土壤中的磷主要是以Fe—P,，A1—P的形態(tài)存在,，利用氟離子在酸性溶液中絡(luò)合Fe3 和Al3 的能力，可使這類土壤中比較活性的磷酸鐵鋁鹽被陸續(xù)活化釋放,，同時由于H 的作用,，也能溶解出部分活性較大的Ca—P，然后用鉬銻抗比色法進(jìn)行測定,。
三,、主要儀器及試劑配制儀器：塑料杯，往復(fù)式振蕩機,，分光光度計或光電比色計試劑： （1）0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提劑稱取1.11克NH4F溶于800毫升水中,，加1.0molL-1HCl25毫升，然后稀釋至1升,，貯于塑料瓶中,，其它試劑同前法。
（2）鉬銻抗試劑 稱取酒石酸銻鉀（KSbOC4H4O6）0.5克,，溶于100毫升水中,，制成5％的溶液。
另稱取鉬酸銨20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升濃硫酸,，邊加邊攪動,，再將0.5％的酒石酸銻鉀溶液100毫升加入到鉬酸銨液中，zui后加至1升,，充分搖勻,，貯于棕色瓶中,，此為鉬銻混合液,。
臨用前（當(dāng)天）稱取1.5克左旋抗壞血酸溶液于100毫升鉬銻混合液中，混勻。此即鉬銻抗試劑,。（有效期24小時,，如貯于冰箱中，則有效期較長,。）
（3）磷標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取0.439克KH2PO4（105℃烘2小時）溶于200毫升水中,，加入5毫升濃H2SO4，轉(zhuǎn)入1升量瓶中,，用水定容,，此為100 mgkg-1磷標(biāo)準(zhǔn)液，可較長時間保存,。取此溶液稀釋20倍即為5 mgkg-1磷標(biāo)準(zhǔn)液,，此液不宜久存。
四,、操作方法與實驗步驟1,、稱取通過1毫米篩孔的風(fēng)干土樣品5克（到0.01克）于150毫升塑料杯中，加入0.03molL-1NH4F—— 0.025 molL-1HCl浸提劑50毫升,，在20—30℃條件下振蕩30分鐘,，取出后立即用干燥漏斗和無磷濾紙過濾于塑料杯中，同時作試劑空白試驗,。
2,、吸取濾液10—20毫升于50毫升容量瓶中，加入10毫升0.8M H3BO3,，再加入二硝基酚指示劑2滴,，用稀HCl和Na0H液調(diào)節(jié)pH至待測液呈微黃，用鉬銻抗試劑5毫升顯色,，并用蒸餾水定容,，搖勻，在室溫高于15℃的條件下放置30分鐘,，用紅色濾光片或660nm波長的光進(jìn)行比色,，以空白溶液的透光率為100（即光密度為0），讀出測定液的光密度,，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出顯色液的磷濃度（mgkg-1）,。
3、標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：吸取含磷（P）5mgkg-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液0,、1,、2、3,、4,、5,、6毫升，分別加入50毫升容量瓶中,，加入10毫升0.8M H3BO3,，再加入二硝基酚指示劑2滴，用稀HCl和Na0H液調(diào)節(jié)pH至待測液呈微黃,，再加入鉬銻抗顯色劑5毫升,，搖勻，定容即得0,、0.1,、0.2、0.3,、0.4,、0.5、0.6 mgkg-1磷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,，與待測溶液同時比色,，讀取吸收值，在方格座標(biāo)紙上以吸收值為縱座標(biāo),，磷mgkg-1數(shù)為橫座標(biāo),，繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。
五,、作業(yè)根據(jù)以下公式計算土壤中*磷的含量 顯色液磷mgkg-1數(shù)×顯色液體積×分取倍數(shù) 土壤中*磷mgkg-1＝—————————————————――――――――————————— 烘干土重（克）
顯色液磷mgkg-1數(shù)：從工作曲線查得顯色液的磷mgkg-1數(shù) 顯色液體積：50毫升 浸提液總體積（50毫升）
分取倍數(shù)＝————--------————————— 吸取浸出液毫升數(shù)六,、參考指標(biāo) 土壤*磷 mgkg-1等級 ＜3 很低 3—7 低 7—20 中等 >20 高