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分光光度計對土壤*磷的測定

閱讀:4015        發(fā)布時間:2016/7/29
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分光光度計對土壤*磷的測定:

磷存在與人體所有細(xì)胞中,,是維持骨骼和牙齒的必要物質(zhì),幾乎參與所有生理上的化學(xué)反應(yīng)。磷還是使心臟有規(guī)律地跳動,、維持腎臟正常機能和傳達(dá)神經(jīng)刺激的重要物質(zhì),。

      一、前沿掌握比色法測定土壤*磷的方法,,了解土壤中磷素形態(tài)及其土壤供磷能力與土壤*磷的關(guān)系,。掌握土壤*磷的浸提,浸提液的處理,,標(biāo)準(zhǔn)曲線制作,,顯色,比色,,計算,。

      二、內(nèi)容與原理酸性土壤中的磷主要是以Fe—P,,A1—P的形態(tài)存在,,利用氟離子在酸性溶液中絡(luò)合Fe3 和Al3 的能力,可使這類土壤中比較活性的磷酸鐵鋁鹽被陸續(xù)活化釋放,,同時由于H 的作用,,也能溶解出部分活性較大的Ca—P,然后用鉬銻抗比色法進(jìn)行測定,。

      三,、主要儀器及試劑配制儀器:塑料杯,往復(fù)式振蕩機,,分光光度計或光電比色計試劑: (1)0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提劑稱取1.11克NH4F溶于800毫升水中,,加1.0molL-1HCl25毫升,然后稀釋至1升,,貯于塑料瓶中,,其它試劑同前法。

      (2)鉬銻抗試劑 稱取酒石酸銻鉀(KSbOC4H4O6)0.5克,,溶于100毫升水中,,制成5%的溶液。

      另稱取鉬酸銨20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升濃硫酸,,邊加邊攪動,,再將0.5%的酒石酸銻鉀溶液100毫升加入到鉬酸銨液中,zui后加至1升,,充分搖勻,,貯于棕色瓶中,,此為鉬銻混合液,。

       臨用前(當(dāng)天)稱取1.5克左旋抗壞血酸溶液于100毫升鉬銻混合液中,混勻。此即鉬銻抗試劑,。(有效期24小時,,如貯于冰箱中,則有效期較長,。)

       (3)磷標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取0.439克KH2PO4(105℃烘2小時)溶于200毫升水中,,加入5毫升濃H2SO4,轉(zhuǎn)入1升量瓶中,,用水定容,,此為100 mgkg-1磷標(biāo)準(zhǔn)液,可較長時間保存,。取此溶液稀釋20倍即為5 mgkg-1磷標(biāo)準(zhǔn)液,,此液不宜久存。

      四,、操作方法與實驗步驟1,、稱取通過1毫米篩孔的風(fēng)干土樣品5克(到0.01克)于150毫升塑料杯中,加入0.03molL-1NH4F—— 0.025 molL-1HCl浸提劑50毫升,,在20—30℃條件下振蕩30分鐘,,取出后立即用干燥漏斗和無磷濾紙過濾于塑料杯中,同時作試劑空白試驗,。

       2,、吸取濾液10—20毫升于50毫升容量瓶中,加入10毫升0.8M H3BO3,,再加入二硝基酚指示劑2滴,,用稀HCl和Na0H液調(diào)節(jié)pH至待測液呈微黃,用鉬銻抗試劑5毫升顯色,,并用蒸餾水定容,,搖勻,在室溫高于15℃的條件下放置30分鐘,,用紅色濾光片或660nm波長的光進(jìn)行比色,,以空白溶液的透光率為100(即光密度為0),讀出測定液的光密度,,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出顯色液的磷濃度(mgkg-1),。

      3、標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:吸取含磷(P)5mgkg-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液0,、1,、2、3,、4,、5,、6毫升,分別加入50毫升容量瓶中,,加入10毫升0.8M H3BO3,,再加入二硝基酚指示劑2滴,用稀HCl和Na0H液調(diào)節(jié)pH至待測液呈微黃,,再加入鉬銻抗顯色劑5毫升,,搖勻,定容即得0,、0.1,、0.2、0.3,、0.4,、0.5、0.6 mgkg-1磷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,,與待測溶液同時比色,,讀取吸收值,在方格座標(biāo)紙上以吸收值為縱座標(biāo),,磷mgkg-1數(shù)為橫座標(biāo),,繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。

      五,、作業(yè)根據(jù)以下公式計算土壤中*磷的含量 顯色液磷mgkg-1數(shù)×顯色液體積×分取倍數(shù) 土壤中*磷mgkg-1=—————————————————――――――――————————— 烘干土重(克)

       顯色液磷mgkg-1數(shù):從工作曲線查得顯色液的磷mgkg-1數(shù) 顯色液體積:50毫升 浸提液總體積(50毫升)

      分取倍數(shù)=————--------————————— 吸取浸出液毫升數(shù)六,、參考指標(biāo) 土壤*磷   mgkg-1等級 <3 很低 3—7 低 7—20 中等 >20 高

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