NCI-H1975 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞

細(xì)胞具體情況介紹：

細(xì)胞名稱                       NCI-H1975 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞

來源                              ATCC細(xì)胞庫

種屬                              人

組織                              肺

生長特性                       半懸浮半貼壁

成瘤情況                       未成瘤

建議使用培養(yǎng)基             

龍躍細(xì)胞庫簡介：

我公司自有高品質(zhì)進(jìn)口來源細(xì)胞庫， 所有細(xì)胞來源為進(jìn)口母細(xì)胞,， 經(jīng)過永生化處理制成傳代細(xì)胞株,， 保證為國內(nèi)高品質(zhì)傳代細(xì)胞株。

另外我們有專門的工程師負(fù)責(zé)售后維護(hù)工作,， 保證您購買細(xì)胞沒有后顧之憂,，  如果對細(xì)胞品質(zhì)不滿意可以無條件退款或免費重新發(fā)貨，直到滿意為止,。

 細(xì)胞處理方法

以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,，具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度，細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,，酌情處理,，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請及時電話或郵件聯(lián)系,。

一．貼壁細(xì)胞

1. 客戶接收到細(xì)胞,，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部,。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 顯微鏡觀察細(xì)胞,，當(dāng)細(xì)胞融匯80%左右（可以傳代的情況下）,，細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
4. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
5. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）,，放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止,。
7. 1000rpm,5min離心,，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，37℃,5%CO₂  培養(yǎng),。

二．懸浮細(xì)胞

1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部,。

2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張）,。

3. 嚴(yán)格無菌操作,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。

4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。

5. 1000rpm,5min離心,，重懸細(xì)胞,。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO₂  培養(yǎng)

維修 PCR/酶標(biāo)儀/所有實驗室儀器

我公司維修站目前國內(nèi)有上海和北京兩個站點  （ 北京和上?？梢耘蓪Ｈ松祥T檢測儀器并運往維修站,， 也可以發(fā)快遞我公司 ）， 免費檢查，  找到問題后報價維修,， 如果報價后您覺得價格高的話可以不修（我們負(fù)責(zé)把機(jī)器原樣寄回）

實驗室儀器維修,， 包括PCR， 酶標(biāo)儀,， 離心機(jī),，分析儀器，天平,，水分計等

從事維修工作的工程師有長達(dá)20年的工作經(jīng)驗,，  可勝任幾乎所有常規(guī)實驗室儀器的維修及校準(zhǔn)等工作， 大熒光定量PCR,， DNA測序儀，小到水分計都可以維修

細(xì)胞培養(yǎng)小課堂 

細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌,、適宜溫度,、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存,、生長,、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),。不論對于整個生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說,，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個*的過程,，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)模克隆,。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞,，這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆,。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù),，通過細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞，又可以借此研究細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、細(xì)胞的合成代謝,、細(xì)胞的生長增殖等。

注意事項

編輯

（1）*次開始培養(yǎng)某種細(xì)胞時,，一定要用該細(xì)胞的名稱進(jìn)行檢索,，可以得到關(guān)于該細(xì)胞的詳細(xì)信息，包括需要使用的培養(yǎng)基,、血清,、添加劑、通常的消化時間、傳代時間等,。對于特定的細(xì)胞（如原代培養(yǎng)的細(xì)胞）,，需要查閱相關(guān)文獻(xiàn)來獲得更準(zhǔn)確的培養(yǎng)方法。

（2）進(jìn)入細(xì)胞間開始細(xì)胞培養(yǎng)時,，必須嚴(yán)格按照下列步驟操作：

①確定所有的細(xì)胞操作用的溶液和耗材都已經(jīng)消毒并檢測沒有問題,，不確定的溶液和耗材請勿使用，除非特殊情況,，不要借用別人的溶液,。

②確定衣服的袖口已經(jīng)卷起或者白大褂的袖口已經(jīng)扎緊。

③確定酒精燈內(nèi)的酒精量,，需要的話及時進(jìn)行補充,。

④確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋,，實驗開始前可以把所有瓶蓋旋松,。

⑤盡量不要直接傾倒溶液，除非瓶口沒有被燒壞,。如果傾倒失敗,，溶液粘在瓶口，請用噴過75%酒精的紙巾仔細(xì)清潔瓶口周圍（不要接觸到瓶口）后在火焰上簡單燒灼,。

⑥操作時如果不能肯定所用的耗材是潔凈的,，必須及時更換。

⑦實驗完畢及時收拾,，保持工作區(qū)域清潔整齊,，后用75%酒精清潔臺面。

（3）細(xì)胞污染的預(yù)防

①實驗用品防止污染,。細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑,、耗材、器材的清洗,、消毒要*,，各種溶液滅菌要仔細(xì)，并在無菌實驗檢測陰性后才能使用,。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔,、消毒、滅菌,。

②操作過程防止污染,。

③穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂后才能進(jìn)入細(xì)胞間。

④實驗開始前需要確定戴的手套沒有問題,，只要接觸過生物安全柜之外的物品,，必須及時對手套進(jìn)行消毒。

⑤進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)間后關(guān)好門，坐下來盡量少走動以免影響生物安全柜的風(fēng)簾,。工作開始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶蓋,。事先要嚴(yán)格檢查所用的器材、溶液和細(xì)胞,，不要把污染品或未經(jīng)消毒的物品帶入無菌室內(nèi),，更不能隨便使用，以免造成大規(guī)模污染,。

⑥細(xì)胞操作時動作要輕,，必須在火焰周圍無菌區(qū)內(nèi)打開瓶口，并將瓶口放在火焰周圍簡單轉(zhuǎn)動燒灼,，注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化,。

⑦實驗操作時生物安全柜的隔板要盡可能放低，盡量減少談話,，打噴嚏或咳嗽時不能對著工作區(qū),，以免造成不必要的污染。

⑧瓶蓋應(yīng)當(dāng)?shù)狗旁谶h(yuǎn)離自己的地方,，以避免瓶蓋被誤操作所污染。

⑨不要從敞開的容器口上方經(jīng)過,，以避免衣服上掉落不明物體對細(xì)胞的污染,。

⑩實驗操作時要注意及時更換巴斯德吸管、移液槍槍頭和移液管,，切勿一根管子做到底,。一旦發(fā)現(xiàn)接觸了非潔凈或者無法確定潔凈的物品必須直接丟棄。實驗完畢應(yīng)及時收拾,，保持實驗室清潔整齊,，后用75%酒精清潔臺面。

（4）防止細(xì)胞交叉污染

①在進(jìn)行多種細(xì)胞培養(yǎng)操作時,，所用器具要嚴(yán)格區(qū)分,，作上標(biāo)記便于辨別。按順序進(jìn)行操作,，一次只處理一種細(xì)胞,，多種細(xì)胞多種操作一起進(jìn)行時易發(fā)生t昆亂。

②在進(jìn)行換液或傳代操作時,，粘有細(xì)胞的移液槍頭和移液管不要觸及試劑瓶瓶口,，以免把細(xì)胞帶到培養(yǎng)基中污染其他細(xì)胞。

③所有細(xì)胞一旦購置,，或從別處引入,，或自己建立，必須及時保種凍存，一旦發(fā)生污染可重新復(fù)蘇細(xì)胞,，繼續(xù)培養(yǎng)