NCI-H1395 人肺腺癌細(xì)胞

細(xì)胞具體情況介紹：

細(xì)胞名稱                       NCI-H1395 人肺腺癌細(xì)胞

來源                              ATCC細(xì)胞庫

種屬                              人

組織                              肺

生長(zhǎng)特性                       半懸浮半貼壁

成瘤情況                       未成瘤

建議使用培養(yǎng)基             

龍躍細(xì)胞庫簡(jiǎn)介：

我公司自有高品質(zhì)進(jìn)口來源細(xì)胞庫,， 所有細(xì)胞來源為進(jìn)口母細(xì)胞， 經(jīng)過永生化處理制成傳代細(xì)胞株,， 保證為國內(nèi)高品質(zhì)傳代細(xì)胞株,。

另外我們有專門的工程師負(fù)責(zé)售后維護(hù)工作， 保證您購買細(xì)胞沒有后顧之憂,，  如果對(duì)細(xì)胞品質(zhì)不滿意可以無條件退款或免費(fèi)重新發(fā)貨,，直到滿意為止。

 細(xì)胞處理方法

以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理,，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),，請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系,。

一．貼壁細(xì)胞

1. 客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部,。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）,。
3. 顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯80%左右（可以傳代的情況下）,，細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理,。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
4. 嚴(yán)格無菌操作,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
5. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）,，放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止,。
7. 1000rpm,5min離心,，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，37℃,5%CO₂  培養(yǎng),。

二．懸浮細(xì)胞

1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部,。

2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）,。

3. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。

4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）,。

5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞,。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,，37℃,5%CO₂  培養(yǎng)

維修 PCR/酶標(biāo)儀/所有實(shí)驗(yàn)室儀器

我公司維修站目前國內(nèi)有上海和北京兩個(gè)站點(diǎn)  （ 北京和上海可以派專人上門檢測(cè)儀器并運(yùn)往維修站,， 也可以發(fā)快遞我公司 ）,， 免費(fèi)檢查,，  找到問題后報(bào)價(jià)維修， 如果報(bào)價(jià)后您覺得價(jià)格高的話可以不修（我們負(fù)責(zé)把機(jī)器原樣寄回）

實(shí)驗(yàn)室儀器維修,， 包括PCR,， 酶標(biāo)儀， 離心機(jī),，分析儀器,，天平，水分計(jì)等

從事維修工作的工程師有長(zhǎng)達(dá)20年的工作經(jīng)驗(yàn),，  可勝任幾乎所有常規(guī)實(shí)驗(yàn)室儀器的維修及校準(zhǔn)等工作,， 大熒光定量PCR， DNA測(cè)序儀,，小到水分計(jì)都可以維修

細(xì)胞培養(yǎng)小課堂 

細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌,、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等）,，使之生存,、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法,。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù),，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說,，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)*的過程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺?。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié),，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆,。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù)，通過細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞,，又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖等,。

注意事項(xiàng)

編輯

（1）*次開始培養(yǎng)某種細(xì)胞時(shí),，一定要用該細(xì)胞的名稱進(jìn)行檢索，可以得到關(guān)于該細(xì)胞的詳細(xì)信息,，包括需要使用的培養(yǎng)基,、血清、添加劑,、通常的消化時(shí)間,、傳代時(shí)間等,。對(duì)于特定的細(xì)胞（如原代培養(yǎng)的細(xì)胞），需要查閱相關(guān)文獻(xiàn)來獲得更準(zhǔn)確的培養(yǎng)方法,。

（2）進(jìn)入細(xì)胞間開始細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),，必須嚴(yán)格按照下列步驟操作：

①確定所有的細(xì)胞操作用的溶液和耗材都已經(jīng)消毒并檢測(cè)沒有問題，不確定的溶液和耗材請(qǐng)勿使用,，除非特殊情況,，不要借用別人的溶液。

②確定衣服的袖口已經(jīng)卷起或者白大褂的袖口已經(jīng)扎緊,。

③確定酒精燈內(nèi)的酒精量,，需要的話及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)充。

④確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置,。為了方便單手開啟瓶蓋,，實(shí)驗(yàn)開始前可以把所有瓶蓋旋松。

⑤盡量不要直接傾倒溶液,，除非瓶口沒有被燒壞,。如果傾倒失敗，溶液粘在瓶口,，請(qǐng)用噴過75%酒精的紙巾仔細(xì)清潔瓶口周圍（不要接觸到瓶口）后在火焰上簡(jiǎn)單燒灼,。

⑥操作時(shí)如果不能肯定所用的耗材是潔凈的，必須及時(shí)更換,。

⑦實(shí)驗(yàn)完畢及時(shí)收拾，保持工作區(qū)域清潔整齊,，后用75%酒精清潔臺(tái)面,。

（3）細(xì)胞污染的預(yù)防

①實(shí)驗(yàn)用品防止污染。細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑,、耗材,、器材的清洗、消毒要*,，各種溶液滅菌要仔細(xì),，并在無菌實(shí)驗(yàn)檢測(cè)陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔,、消毒,、滅菌。

②操作過程防止污染,。

③穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂后才能進(jìn)入細(xì)胞間,。

④實(shí)驗(yàn)開始前需要確定戴的手套沒有問題，只要接觸過生物安全柜之外的物品,，必須及時(shí)對(duì)手套進(jìn)行消毒,。

⑤進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)間后關(guān)好門,，坐下來盡量少走動(dòng)以免影響生物安全柜的風(fēng)簾。工作開始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶蓋,。事先要嚴(yán)格檢查所用的器材,、溶液和細(xì)胞，不要把污染品或未經(jīng)消毒的物品帶入無菌室內(nèi),，更不能隨便使用,，以免造成大規(guī)模污染。

⑥細(xì)胞操作時(shí)動(dòng)作要輕,，必須在火焰周圍無菌區(qū)內(nèi)打開瓶口,，并將瓶口放在火焰周圍簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)動(dòng)燒灼，注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化,。

⑦實(shí)驗(yàn)操作時(shí)生物安全柜的隔板要盡可能放低,，盡量減少談話，打噴嚏或咳嗽時(shí)不能對(duì)著工作區(qū),，以免造成不必要的污染,。

⑧瓶蓋應(yīng)當(dāng)?shù)狗旁谶h(yuǎn)離自己的地方，以避免瓶蓋被誤操作所污染,。

⑨不要從敞開的容器口上方經(jīng)過,，以避免衣服上掉落不明物體對(duì)細(xì)胞的污染。

⑩實(shí)驗(yàn)操作時(shí)要注意及時(shí)更換巴斯德吸管,、移液槍槍頭和移液管,，切勿一根管子做到底。一旦發(fā)現(xiàn)接觸了非潔凈或者無法確定潔凈的物品必須直接丟棄,。實(shí)驗(yàn)完畢應(yīng)及時(shí)收拾,，保持實(shí)驗(yàn)室清潔整齊，后用75%酒精清潔臺(tái)面,。

（4）防止細(xì)胞交叉污染

①在進(jìn)行多種細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí),，所用器具要嚴(yán)格區(qū)分，作上標(biāo)記便于辨別,。按順序進(jìn)行操作,，一次只處理一種細(xì)胞，多種細(xì)胞多種操作一起進(jìn)行時(shí)易發(fā)生t昆亂,。

②在進(jìn)行換液或傳代操作時(shí),，粘有細(xì)胞的移液槍頭和移液管不要觸及試劑瓶瓶口，以免把細(xì)胞帶到培養(yǎng)基中污染其他細(xì)胞,。

③所有細(xì)胞一旦購置,，或從別處引入，或自己建立，必須及時(shí)保種凍存,，一旦發(fā)生污染可重新復(fù)蘇細(xì)胞,，繼續(xù)培養(yǎng)