近年來(lái),,隨著多功能
ELX800 酶標(biāo)儀在國(guó)內(nèi)各高校實(shí)驗(yàn)室逐漸推廣開來(lái),,多功能ELX800 酶標(biāo)儀品牌和型號(hào)也逐漸多了起來(lái),,亂花漸欲迷人眼,。除了三大傳統(tǒng)優(yōu)勢(shì)品牌PE,、MD和TECAN,,還出現(xiàn)了眾多后來(lái)者插足此市場(chǎng),,如收購(gòu)了芬蘭雷勃的Thermo,、從發(fā)光起家的Berthold,、針對(duì)藥篩領(lǐng)域的BMG以及新興的BioTek等品牌。各品牌都有各自的一個(gè)甚多個(gè)系列產(chǎn)品線,,特性各不相同,,選購(gòu)時(shí)各種技術(shù)參數(shù)、技術(shù)指標(biāo)令人眼花繚亂,。
本文嘗試從用戶實(shí)際使用的角度,,探討應(yīng)該如何看待花樣繁多的參數(shù)特性,希望能幫助大家找到真正合適自己的
ELX800 酶標(biāo)儀,。
一,、濾片Vs光柵
ELX800 酶標(biāo)儀的分類方法眾多,但簡(jiǎn)單的莫過于用他們的濾光方式來(lái)作分界線。一般來(lái)說(shuō),,可以分為濾光片型和光柵型兩大類,。當(dāng)然也有一些型號(hào),例如Synergy4和EnVision等,,一臺(tái)機(jī)器里面同時(shí)裝上了濾光片和光柵,。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測(cè),還是想用光柵的時(shí)候用光柵,,該用濾片的時(shí)候用濾片;還有一些實(shí)驗(yàn)非用其中一個(gè)不可,,另一模塊實(shí)現(xiàn)不了的。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,,并沒有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破,。
總體來(lái)說(shuō),濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,,配合二向色鏡(其實(shí)也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng),,可以實(shí)現(xiàn)大部分實(shí)驗(yàn)的需要。目前常規(guī)
ELX800 酶標(biāo)儀中高的檢測(cè)靈敏度就是用濾光片型做出來(lái)的,,例如TECANInfiniteF500的熒光檢測(cè)的靈敏度可以達(dá)到0.04fmol/孔(熒光素,384孔/80ul),。但是濾光片型儀器由于受限于濾片的波長(zhǎng)和數(shù)量限制,,不可能滿足日益增加的實(shí)驗(yàn)類型的檢測(cè)需要,而且有時(shí)需要對(duì)物質(zhì)的吸收,、激發(fā)和發(fā)射光譜進(jìn)行研究,,所以后來(lái)就誕生了光柵型的儀器。
先推出光柵的是MD公司,,其光柵習(xí)慣上稱為單光柵,。由于光純度的不足,在光柵的后面又加入了一組帶阻濾片,,再把雜光過濾一遍,,達(dá)到了5×10-4的雜光率,基本與純粹的濾光片系統(tǒng)一致,。后來(lái)TECAN又發(fā)展出了雙光柵技術(shù),,通過兩次光柵濾光,雜光率降到了10-6,。后來(lái),,Thermo、BioTek和PE的部分新款儀器等都使用了類似雙光柵技術(shù),。由于激發(fā)和發(fā)射各用了一組雙光柵,,此類機(jī)器又被稱為四光柵型
ELX800 酶標(biāo)儀。
光柵型ELX800 酶標(biāo)儀的推陳出新,使得用戶在波長(zhǎng)選擇上不再受限,,而且在雜光率、帶寬控制等性能上還超越了濾光片系統(tǒng),。例如,,TECAN公司在2008年底推出使用了第三代四光柵系統(tǒng)的
ELX800 酶標(biāo)儀,雜光率降到了2×10-7的新低,,還實(shí)現(xiàn)了帶寬2.5~20nm連續(xù)可調(diào),。這些都是目前濾光片型ELX800 酶標(biāo)儀所不能或者較難實(shí)現(xiàn)的。
二,、雜光率&波長(zhǎng)準(zhǔn)確性
光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能
ELX800 酶標(biāo)儀的主流,,多家廠家共同努力,已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高,。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中,,關(guān)鍵的無(wú)疑就是光柵的雜光率和波長(zhǎng)選擇的準(zhǔn)確性了。
雜光率指得就是光源通過光柵后,,得到的光線中,,“不需要”的波長(zhǎng)的光占所標(biāo)稱波長(zhǎng)的光的比例,表征了濾光的純度,。由于光線干涉,、衍射等的復(fù)雜性,無(wú)論使用濾光片還是光柵,,雜光都是不可避免的,。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來(lái)說(shuō),,濾光片型的雜光率在10-4~10-5之間,,光柵型的可以做到10-6~10-7。由于此類雜光是非特異的,,而且會(huì)直接進(jìn)入后的檢測(cè)器,,所以有多少的雜光就會(huì)引入多少的隨機(jī)誤差。在熒光等檢測(cè)過程中,,由于檢測(cè)器存在放大效應(yīng),,雜光率的干擾也會(huì)被指數(shù)級(jí)放大。因此,,雜光率就是一個(gè)濾光系統(tǒng)的要性能指標(biāo),。
光柵的另一個(gè)重要指標(biāo)就是波長(zhǎng)選擇的準(zhǔn)確性。因?yàn)楹芏鄼z測(cè)是依賴于物質(zhì)在某個(gè)波長(zhǎng)的特征圖譜,。就像DNA/RNA的OD260濃度測(cè)定,,實(shí)際檢測(cè)波長(zhǎng)偏離260nm幾個(gè)nm以上的話,OD值與終濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會(huì)發(fā)生改變。因此,,一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng),,他的波長(zhǎng)選擇準(zhǔn)確性應(yīng)該是在±0.5~1nm之間。波長(zhǎng)偏離過大有時(shí)就會(huì)影響到終結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
這兩個(gè)可謂是光柵甚濾光片濾光系統(tǒng)關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù),,直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測(cè)量的結(jié)果,是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的基本要求
三,、品牌與售后
不同品牌的儀器往往性能側(cè)重點(diǎn)有所不用,。例如,PE公司由于在試劑領(lǐng)域有較深底蘊(yùn),,他們的ELX800 酶標(biāo)儀在配合使用他們的TRF系列檢測(cè)試劑盒上作了多項(xiàng)優(yōu)化,,因此PE的ELX800 酶標(biāo)儀普遍來(lái)說(shuō)在TRF領(lǐng)域會(huì)有較多的特色功能和相對(duì)較高的性能指標(biāo)。而像TECAN,,就把研發(fā)的重點(diǎn)放在了四光柵的研究方面,,近年來(lái)相繼推出了第二和第三代光柵型多功能ELX800 酶標(biāo)儀,成為四光柵ELX800 酶標(biāo)儀領(lǐng)域的*,。而像多功能ELX800 酶標(biāo)儀上加入比色杯,、微量檢測(cè)板等功能也是TECAN從用戶角度考慮作出的技術(shù)創(chuàng)新,后來(lái)此類技術(shù)都成為了Thermo,、BioTek等品牌紛紛仿效的對(duì)象,。
后,無(wú)論是一臺(tái)多好的ELX800 酶標(biāo)儀,,脫離了良好的售后服務(wù)體系也是難以正常運(yùn)作的,。今年,,各家廠商都在中國(guó)國(guó)內(nèi)設(shè)立了辦事處甚亞太區(qū)總部,,有些產(chǎn)品還專門研發(fā)了中文版的軟件和說(shuō)明書。這都說(shuō)明了廠家對(duì)中國(guó)市場(chǎng)的重視,。而正因?yàn)檫@種重視,,無(wú)論是*還是選擇代理分銷,都會(huì)對(duì)國(guó)內(nèi)的售后服務(wù)提出各自的要求和期望,,基本的就是普及儀器的應(yīng)用工程師和維修工程師網(wǎng)絡(luò)體系,。
可以說(shuō),國(guó)內(nèi)的各大城市里面,,基本已經(jīng)做到了部分品牌總有一個(gè)工程師在你身邊,。選購(gòu)之前多與工程師交流,充分了解各家的性能特長(zhǎng)和售后情況,,反復(fù)對(duì)比,,總能找到自己需要的一款多功能ELX800 酶標(biāo)儀。