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使用NanoPhotometer®豐富的應(yīng)用程序進(jìn)行ADC藥物分析
抗體-藥物偶聯(lián)物即ADC是一類(lèi)生物制藥藥物，是通過(guò)化學(xué)鏈將具有生物活性的小分子藥物連接到抗體上,，抗體作為載體將小分子藥物靶向運(yùn)輸?shù)侥繕?biāo)細(xì)胞中被設(shè)計(jì)用于治療癌癥的靶向療法。與化學(xué)療法不同，ADC 旨在靶向并殺死腫瘤細(xì)胞，同時(shí)保留健康細(xì)胞,。類(lèi)似的還有新興的AOC（抗體-寡核苷酸偶聯(lián)物）基因治療技術(shù)。
NanoPhotometer®超微量分光光度計(jì)作為標(biāo)準(zhǔn)的紫外-可見(jiàn)法分析設(shè)備,，已廣泛的應(yīng)用于包括ADC在內(nèi)的單抗,、雙抗的定量。同時(shí),，設(shè)備的多波長(zhǎng)/全波長(zhǎng)測(cè)量功能,，能夠同時(shí)測(cè)量抗體及偶聯(lián)物的吸光值和濃度。這使測(cè)量藥物抗體比（DAR）變得十分方便,。DAR能明顯影響ADC藥物的毒性,。如DAR過(guò)低，則抗體攜帶的效率較低,；反之,，如DAR 過(guò)高，機(jī)體易將其識(shí)別為異物從而快速清除,。DAR的異質(zhì)性也可能導(dǎo)致毒性的不確定,，造成毒性脫靶,。
應(yīng)用程序1 UV法蛋白定量
標(biāo)準(zhǔn)的UV法蛋白定量模塊，提供基于消光系數(shù)法的蛋白濃度測(cè)量,，測(cè)量主波長(zhǎng)默認(rèn)為280nm，同時(shí)也可根據(jù)抗體樣品實(shí)際的最大吸收波長(zhǎng)進(jìn)行設(shè)置,。對(duì)于空載抗體的定量,，通常使用默認(rèn)的UV280法，并使用默認(rèn)的320nm背景校正,。當(dāng)測(cè)量ADC樣品時(shí),，由于偶聯(lián)藥物的吸收峰通常出現(xiàn)在300-400nm之間，并于抗體之間有連續(xù)的紫外吸收,，因此建議關(guān)閉背景校正功能（對(duì)于澄清樣品）,，以獲得準(zhǔn)確的吸光值/濃度。在此模式下,，如想在獲得抗體濃度的同時(shí),，也測(cè)量偶聯(lián)物的吸光值，可點(diǎn)擊光譜曲線(xiàn),，可選擇查看任意波長(zhǎng)下的吸光值,，找到對(duì)應(yīng)的偶聯(lián)物的最大吸收波長(zhǎng)和吸光值即可。
應(yīng)用程序2 多波長(zhǎng)測(cè)量
在分析化學(xué)應(yīng)用界面中,，選擇單/多波長(zhǎng)測(cè)量模塊,，根據(jù)抗體和偶聯(lián)物的最大吸收波長(zhǎng)，進(jìn)行測(cè)量波長(zhǎng)設(shè)置,，并進(jìn)行背景校正波長(zhǎng)設(shè)置（可根據(jù)需要設(shè)置在可見(jiàn)光/近紅外波長(zhǎng)區(qū)域）,。測(cè)量結(jié)果可直接顯示抗體和偶聯(lián)物的吸光值，并輸出為報(bào)告,。
應(yīng)用程序3 比值測(cè)量
核酸樣品的A260/A280,、A260/A230比值是大家熟知的，而對(duì)于其他樣品而言,，吸光值比值測(cè)量模塊可支持自定義的雙波長(zhǎng)下吸光值比值的計(jì)算,。如抗體測(cè)量A280值，偶聯(lián)物測(cè)量A378,，則可得到兩個(gè)波長(zhǎng)的吸光值和比值結(jié)果,，并輸出為報(bào)告。
ADC樣品測(cè)量的良好實(shí)踐：
1. 可使用N60/NP80的混勻器進(jìn)行5-10秒的樣品充分混勻
2. 基于測(cè)量目的,，選擇對(duì)應(yīng)的應(yīng)用程序
3. 正確設(shè)置背景校正波長(zhǎng),，這非常重要
4. 正確的清潔，高濃度或高粘度樣品建議進(jìn)行空白回測(cè)
NanoPhotometer®還可配置符合GxP及《藥品數(shù)據(jù)管理規(guī)范》要求的合規(guī)性軟件,，具有多層級(jí)用戶(hù)管理,、電子記錄和電子簽名,、審計(jì)追蹤和接入控制等功能，滿(mǎn)足客戶(hù)的合規(guī)性流程需要,，在包括ADC在內(nèi)的生物制藥工藝開(kāi)發(fā),、中試、生產(chǎn),、質(zhì)控中具有廣泛的使用場(chǎng)景和用戶(hù)基礎(chǔ),。
* 本文轉(zhuǎn)載自「Implen超微量分光光度計(jì)」公眾號(hào)