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梅特勒托利多 METTLER TOLEDO

細胞培養(yǎng)的這些細節(jié)不能忽視,!

時間:2024-6-21 閱讀:341
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細胞培養(yǎng)是生物研究的核心,,是在其自然環(huán)境以外的受控條件下培養(yǎng)和維持細胞的過程,對研究基礎(chǔ)細胞生物學(xué)和生物化學(xué),、研究疾病和開發(fā)新療法等多個研究領(lǐng)域都至關(guān)重要,。

 

梅特勒托利多全新推出《細胞培養(yǎng)指南》提供從細胞選擇到細胞處理和轉(zhuǎn)導(dǎo),整個細胞培養(yǎng)過程的分步指南,,旨在幫助您充分利用細胞培養(yǎng)實踐,。

掃描下方二維碼

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《細胞培養(yǎng)指南》

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今天,,就帶大家先來了解一些細胞培養(yǎng)中的基礎(chǔ)內(nèi)容,更多內(nèi)容請掃描上方二維碼下載指南,。

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細胞的類型與特點

?為了實現(xiàn)成功的細胞培養(yǎng),,須分析各類可用細胞的優(yōu)缺點,了解哪類細胞能提供最有益的產(chǎn)出,。

貼壁,、懸浮培養(yǎng)

  • 貼壁細胞

貼壁細胞在培養(yǎng)皿上單層生長。在傳代過程中,,必須使用分離劑(如胰蛋白酶或細胞消化液)將這些細胞分離;而通常情況下,,它們會在接種后2-4小時內(nèi)重新粘附到孔板上,。

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  • 懸浮細胞(即淋巴母細胞樣細胞)

不會粘附在培養(yǎng)皿表面,而是懸浮在培養(yǎng)基中,。它們通常成團生長,,尤其是在密度較高處。

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原代細胞,、永生化細胞系和iPSC

  • 原代細胞

從其原生組織中直接分離并體外培養(yǎng),。常用的原代細胞包括通過皮膚活檢直接從患者體內(nèi)分離出的成纖維細胞、從胚胎期或出生后的小鼠或大鼠的大腦特定區(qū)域離解出的神經(jīng)元,,以及從患者血液樣本中分離出的紅細胞,。

  • 永生化細胞系

與原代細胞一樣來源于組織樣本,但已經(jīng)歷過永生化,,細胞系可以多次傳代而不喪失活性,,并繞開與原代細胞相關(guān)的倫理規(guī)范。細胞系通常易于培養(yǎng),,還可在液氮中冷凍以長期儲存,,并在日后復(fù)蘇(解凍)以繼續(xù)使用。

  • iPSC

誘導(dǎo)多能干細胞(簡稱iPSC或iPS細胞)衍生自血液或皮膚,,已被重新編程為多能性干細胞(或胚胎樣干細胞),,這意味著它們可以分化成任何類型的人體細胞。在不同的發(fā)育階段添加特異性生長因子可以使細胞分化成所需的類型,。

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細胞培養(yǎng)的成功因素

細胞培養(yǎng)中的許多挑戰(zhàn)都源于不良的液體處理技術(shù),,而通過優(yōu)化移液器選擇,減少所需的處理步驟并規(guī)范移液操作,,可以改善或避免這些挑戰(zhàn),。

以下幾個特點需特別注意:

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01 無菌性

細胞培養(yǎng)中使用的液體處理設(shè)備和耗材可能會滋生許多微生物。遵循以下建議可降低液體處理設(shè)備與細胞之間交叉污染的概率

• 細胞培養(yǎng)中使用的設(shè)備(包括單通道,、多通道移液器和連續(xù)分配器)應(yīng)專用于其對應(yīng)區(qū)域

• 在細胞培養(yǎng)設(shè)施中使用任何移液器之前,,先用70%的酒精對其移液端進行消毒,并盡可能使用無菌濾芯吸頭

• 計劃定期清潔儀器的內(nèi)部組件

• 定期對儀器進行維修保養(yǎng),以驗證其內(nèi)部組件的完整性(即確保無腐蝕,、破損組 件等)

• 定期更換電動助吸器的濾芯

02 可重現(xiàn)性

培養(yǎng)參數(shù),、細胞處理、細胞接種和細胞活性也會影響細胞培養(yǎng)實驗的可重現(xiàn)性,。對于儀器,,用戶必須驗證以下幾點:

 制造商技術(shù)規(guī)格:系統(tǒng)誤差和隨機誤差

• 移液器的完整性:確保無部件缺失或破損、內(nèi)部腐蝕等

 定期校準服務(wù):服務(wù)時間間隔越短,,早發(fā)現(xiàn)破損情況的幾率就越高,,移液器的使用也就越符合規(guī)范

03 速度和效率

在細胞培養(yǎng)環(huán)境中,務(wù)必迅速操作以保持細胞活性并避免細胞過長時間暴露在次優(yōu)條件下,。這對于精細細胞系或已經(jīng)受到壓力的細胞尤其重要?。ɡ鐝哪X組織中分離出的原代神經(jīng)元)

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細胞培養(yǎng)液體處理工具

一個好的液體處理工具,是細胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一,!現(xiàn)開放免費試用,!

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