自噬
自噬是真核細胞在受到某些敵對條件（例如營養(yǎng)剝奪）時所觸發(fā)的溶酶體介導(dǎo)的細胞內(nèi)大規(guī)模降解途徑,，并觸發(fā)細胞內(nèi)含物的消化和再循環(huán),。各種細胞質(zhì)成分，包括細胞器,、聚集蛋白和長壽命蛋白,，被隔離至雙層膜自噬體后與溶酶體發(fā)生融合，致使溶酶體含量降低,。自噬活性對于維持細胞穩(wěn)態(tài)和能量平衡至關(guān)重要,。盡管通常在基礎(chǔ)條件下較少發(fā)生，但是自噬可以被多種生理刺激,，如營養(yǎng)不足,、缺氧、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激以及免疫和激素刺激,，從而

自噬?

通過創(chuàng)新檢測方法更清楚地了解自噬和疾病

 

◆自噬分析工具

自噬定義

自噬是真核細胞在受到某些敵對條件（例如營養(yǎng)剝奪）時所觸發(fā)的溶酶體介導(dǎo)的細胞內(nèi)大規(guī)模降解途徑,，并觸發(fā)細胞內(nèi)含物的消化和再循環(huán)。各種細胞質(zhì)成分,，包括細胞器,、聚集蛋白和長壽命蛋白，被隔離至雙層膜自噬體后與溶酶體發(fā)生融合,，致使溶酶體含量降低,。自噬活性對于維持細胞穩(wěn)態(tài)和能量平衡至關(guān)重要,。盡管通常在基礎(chǔ)條件下較少發(fā)生，但是自噬可以被多種生理刺激,，如營養(yǎng)不足,、缺氧、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激以及免疫和激素刺激,，從而顯著上調(diào),。越來越多的證據(jù)表明自噬過程中的功能失常與許多臨床相關(guān)疾病有關(guān)，包括癌癥,、神經(jīng)退行性疾病,、糖尿病、自身免疫性疾病和心血管疾病,。更深入了解自噬活性的好處和潛在后果，有助于開發(fā)自噬靶向療法,。

 

◆自噬囊泡形成

自噬途徑

◆自噬檢測

活細胞檢測試劑盒

強大的活細胞分析試劑盒,，用于定量檢測自噬，聚集小體,，溶酶體攝動等,。

Enzo CELLESTIAL^® 產(chǎn)品系列是基于細胞的測定的強大的試劑，包括用于測量自噬,，聚集小體聚集和溶酶體擾動,，所有這些均適用于自噬分析。

CYTO-ID^® 自噬檢測試劑盒是一種用于監(jiān)測活細胞自噬的無轉(zhuǎn)染定量測定方法,。該檢測適用于流式細胞術(shù)和顯微鏡檢查,，有助于高通量篩選自噬激活劑和抑制劑。CYTO-ID^® 自噬檢測試劑盒包括一種選擇性地染色前自噬體,，自噬體和自溶酶體（自噬體）,，而對溶酶體的染色相對較少的染料。

●　選擇性染色自噬囊泡,，無需耗時的LC3融合蛋白轉(zhuǎn)染

●　在天然異質(zhì)細胞群體中的快速大量的自噬

●　在多種條件下進行驗證,，并使用已知會影響自噬途徑的小分子調(diào)節(jié)劑

●　溶酶體基本不會染色，減少了其他染料（例如MDC）所見的背景

 

無需轉(zhuǎn)染即可進行自噬 與點狀細胞（底部）相比,，點狀細胞質(zhì)結(jié)構(gòu)的存在（頂部）證明饑餓導(dǎo)致綠色熒光強度增加,。細胞核用Hoechst染料復(fù)染（藍色）。

 

產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝
ENZ-51031-K200	CYTO-ID自噬檢測試劑盒	200 tests
ENZ-51031-0050		50 tests
ENZ-51034-K500	溶酶體綠色檢測試劑盒（顯微鏡）	500 tests
ENZ-51034-0100		100 tests
ENZ-51015-KP002	溶酶體細胞毒理檢測試劑盒（紅色熒光）（綠色細胞系）（微孔板）	1 Kit
ENZ-51035-0025	ProteoStat 蛋白聚集小體檢測試劑盒（流式細胞儀和熒光顯微鏡）	25 tests
ENZ-51035-K100		100 tests
ENZ-52252	MM 4-64	1 mg

 

自噬ELISA試劑盒

靈敏的NBR1和p62 ELISA試劑盒可對人,、大鼠和小鼠細胞裂解物中的自噬生物標記物NBR1和p62（Sequestosome 1）進行定量免疫檢測,。NBR1和p62充當(dāng)支架蛋白,，有助于自噬蛋白的運輸和降解,。該ELISA試劑盒可定量測量自噬,，而無需昂貴的設(shè)備或漫長的過程。

●　可靈敏地分別檢測低至66 pg/mL和100 pg/mL的NBR1和p62

●　結(jié)果*定量,，優(yōu)于半定量蛋白質(zhì)印跡分析

●　高通量格式可在不到3小時內(nèi)分析多達40個樣品

●　操作簡單和試劑標識不同的顏色,，節(jié)省了實驗時間并減少實驗誤差

 

用自噬誘導(dǎo)藥物或賦形劑處理人乳腺癌細胞。處理6和12小時后收獲細胞,，裂解細胞并用p62 ELISA試劑盒分析,，并通過Westernblottingp62和LC3-II。藥物治療與自噬的誘導(dǎo)相關(guān),，如p62水平的降低（A和B）和LC3-II水平的升高（C）所示,。

 

產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝
ADI-900-212-0001	P62酶聯(lián)免疫試劑盒	96 wells
ADI-900-214-0001	葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78/結(jié)合免疫球蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒	96 wells

 

自噬抗體與蛋白

Enzo Life Sciences提供了大量自噬相關(guān)的純化蛋白，以及肽段,、全長/部分蛋白,、修飾多肽/蛋白、經(jīng)過大量驗證的單克隆和多克隆抗體,。許多抗體也可以提供酶或熒光標記的偶聯(lián)物,，擴大了應(yīng)用范圍，包括Western blot,，流式細胞術(shù),，IHC，ICC,，IF,，IP等。

 

單泛素/多泛素偶聯(lián)物單抗（FK2）

●　檢測K²⁹,，K⁴⁸和K⁶³連接的單泛素化和多泛素化蛋白

●　經(jīng)過WB,，IP，IHC和ELISA應(yīng)用驗證

●　可用于HRP,、生物素,、ATTO 488和熒光素標記的結(jié)合物使用

 

圖1：Polyubiquitinylated conjugates monoclonal antibody (FK1)（產(chǎn)品編號：BML-PW8805）（泳道 A-C）與Mono-and polyubiquitinylated conjugates monoclonal antibody (FK2)（產(chǎn)品編號：BML-PW8810）（泳道 D-F）進行蛋白質(zhì)印跡。Lane A與D：K48連接,。Lane B與E：K29連接,。Lane C與F：K63連接

 

產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝
BML-SE491-0005	AM蛋白激酶 （人）, （重組） （His-標簽）	5 μg
ALX-803-080-C100	LC3B, 單抗 （5F10）	100 μg
BML-PW8810-0500	單泛素/多泛素偶聯(lián)物單抗（FK2）	500 μg
BML-PW8810-0100		100 μg
ADI-SPA-820-F	熱休克同源蛋白70/熱休克蛋白70, 單抗 （N27F3-4）	200 µg
ADI-SPA-820-D		50 µg
ADI-905-721-100	自噬基因Beclin1多抗	100 μg
ADI-APR-100-0200	重組人LC3-I蛋白（His標簽）	200 µg
ADI-APR-100-0050		50 µg
ADI-905-687-100	mTOR多抗	100 μg
BML-PW9860-0100	P62（人）多抗	100 µL
BML-PW9860-0025		25 µL
ALX-215-065-1	mTOR （人 FRB 結(jié)構(gòu)域）, 多抗	1 Vial

 

◆自噬調(diào)控

自噬庫與途徑調(diào)節(jié)劑

Enzo自噬化合物庫是精選的96種自噬激活劑與抑制劑的集合。我們的化學(xué)家對現(xiàn)成的篩選庫進行了全面研究,，所含的所有單個化合物均可單獨訂購,。此外，許多常見的自噬抑制劑和活化劑,，如下面所列產(chǎn)品,，也可以作為標準目錄產(chǎn)品購買。

產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝
BML-2837-0500	SCREEN-WELL 自噬化合物庫	1 library
BML-2837-0100		1 library
BML-CM110-0100	巴弗洛霉素A1	100 μg
ALX-550-253-G005	利多卡因 鹽酸鹽	5 g
BML-PI102-0025	MG-132	25 mg
BML-PI102-0005		5 mg
BML-A275-0005	雷帕霉素	5 mg
BML-A275-0025		25 mg
BML-EI397-0025	SMER28	25 mg
BML-EI397-0005		5 mg
ALX-550-095-G001	他莫昔芬檸檬酸鹽	1 g
ALX-550-306-G005	鹽酸維拉帕米	5 g
ALX-550-306-G001		1 g