關(guān)于超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)的用法,,以下有著詳細(xì)介紹
閱讀:885 發(fā)布時(shí)間:2022-5-20
超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)是指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,,使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù),是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)的基礎(chǔ),,由于細(xì)菌,、酵母、真菌,、植物細(xì)胞壁的組成成分不同,,且同類細(xì)胞竭誠(chéng)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)也不同,所以其細(xì)胞壁的堅(jiān)固程度不同,。
而動(dòng)物細(xì)胞雖沒有細(xì)胞壁,,但具有細(xì)胞膜,也需要一定的細(xì)胞破碎方法來破膜,,以此達(dá)到提取產(chǎn)物的目的,。下面就列舉了幾個(gè)重要的方法,可供參考:
1,、化學(xué)及生物化學(xué)法:
?、僮匀芊ǎ涸谝欢≒H和適當(dāng)?shù)臏囟认拢媒M織細(xì)胞內(nèi)自身的酶系統(tǒng)將細(xì)胞破碎的方法,。此過程需較長(zhǎng)時(shí)間,,常用少量防腐劑如甲苯、氯仿等防止細(xì)胞的污染,;
?、诿溉芊ǎ豪酶鞣N水解酶,如溶菌酶,、纖維素酶,、蝸牛酶,、半纖維素酶、脂酶等,,將細(xì)胞壁分解,,使細(xì)胞內(nèi)含物釋放出來。有些細(xì)菌對(duì)溶菌酶不敏感,,加入少量巰基試劑或8摩爾尿素處理后,,使之轉(zhuǎn)為對(duì)溶菌酶敏感而溶解;
?、刍瘜W(xué)滲透法:某些有機(jī)溶劑,、抗生素、表面活性劑,、金屬螯合劑,、變性劑等化學(xué)藥品都可以改變細(xì)胞壁或膜的通透性從而使內(nèi)合物有選擇地滲透出來。其作用機(jī)理,;化學(xué)滲透取決于化學(xué)試劑的類型以及細(xì)胞壁和膜的結(jié)構(gòu)與組成,。
2、物理法:
?、俜磸?fù)凍溶法:
原理:因突然冷凍,,細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成及胞內(nèi)外溶劑濃度的突然改變而破壞細(xì)胞;
方法:將待破碎的細(xì)胞在-20度以下冰凍,,室溫融解,,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎,。
②急熱驟冷法:
將材料投入沸水中,,維持85-90分鐘,,至水浴中急速冷卻,此法可用于細(xì)菌及病毒材料,;
就目前超聲波儀器主要有超聲波振蕩器以及超聲波粉碎儀等,。
其優(yōu)點(diǎn)是保持細(xì)胞活性,省時(shí),,樣品損失少,,可以處理大量樣品。因此超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)的不斷發(fā)展和改進(jìn),,對(duì)大規(guī)模生產(chǎn)的貢獻(xiàn)是十分可觀的,。超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)進(jìn)行超聲粉碎破碎是目前在生物生產(chǎn)中常用的破碎方法,。對(duì)不同菌種的發(fā)酵液,。超聲破碎的效果差別較大,。一般地,桿菌比球菌較易破碎,,革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞比革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌細(xì)胞較易破碎,,對(duì)酵母菌的效果較差。