菌落計數(shù)器的7種常見計數(shù)方法介紹
閱讀:11799 發(fā)布時間:2019-6-26
菌落計數(shù)器由計數(shù)器,、探筆,、計數(shù)池等部分組成,,計數(shù)器采用CMOS集成電路精心設(shè)計,LED數(shù)碼管顯示,,字高13mm,,清晰明亮,配合探筆,,計數(shù)靈敏,,菌落對比清楚。便于觀察,??捎糜谑称贰嬃?、藥品,、生物制品、化妝品,、衛(wèi)生用品,、飲用水,、生活污水、工業(yè)廢水,、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗,。那么菌落計數(shù)器都是怎樣進行計數(shù)的呢?下面介紹下菌落計數(shù)器的計數(shù)方法,。
1.計數(shù)器測定法
即用血細(xì)胞計數(shù)器進行計數(shù),。取一定體積的樣品細(xì)胞懸液置于血細(xì)胞計數(shù)器的計數(shù)室內(nèi),用顯微鏡觀察計數(shù),。由于計數(shù)室的容積是一定的(O.1mm3),,因而根據(jù)計數(shù)器刻度內(nèi)的細(xì)菌數(shù),可計算樣品中的含菌數(shù),。本法簡便易行,,可立即得出結(jié)果(本法不僅適于細(xì)菌計數(shù),也適用于酵母菌及霉菌孢子計數(shù)),。
2.電子計數(shù)器計數(shù)法
電子計數(shù)器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,,小孔僅能通過一個細(xì)胞,當(dāng)一個細(xì)胞通過這個小孔時,,電阻明顯增加,,形成一個脈沖,自動記錄在電子記錄裝置上,。該法測定結(jié)果較,,但它只識別顆粒大小,而不能區(qū)分是否為細(xì)菌,。因此,,要求菌懸液中不含任何碎片。
3.活細(xì)胞計數(shù)法
常用的有平板菌落計數(shù)法,,是根據(jù)每個活的細(xì)菌能長出一個菌落的原理設(shè)計的,。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,,然后將定量的稀釋液進行平板,,根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù),可算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù),。此法靈敏度高,,是一種檢測污染活菌數(shù)的方法,也是目前上許多國家所采用的方法,。使用該法應(yīng)注意:①一般選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進行計數(shù),,過多或過少均不;②為了防止菌落蔓延,,影響計數(shù),,可在培養(yǎng)基中加入O.001%2,,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC),;③本法限用于形成菌落的微生物,。應(yīng)用于水、牛奶,、食物,、藥品等各種材料的細(xì)菌檢驗,是常用的活菌計數(shù)法,。
4.比濁法
比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測定細(xì)菌的數(shù)量,。細(xì)菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比,與光密度成正比,,所以,,可用光電比色計測定菌液,,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度,。此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細(xì)菌的懸浮液,,得出相對的細(xì)菌數(shù)目,,對顏色太深的樣品,不能用此法測定,。
5.測定細(xì)胞重量法
此法分為濕重法和干重法,。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進行稱重;干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后,,以清水洗凈放人干燥器加熱烘干,,使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品,,是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法,。
6.測定細(xì)胞總氮量或總碳量
氮、碳是細(xì)胞的主要成分,,含量較穩(wěn)定,,測定氮、碳的含量可以推知細(xì)胞的質(zhì)量,。此法適于細(xì)胞濃度較高的樣品,。
7、顏色改變單位法(colour change unit,簡稱CCU)
這種方法通常用于很小,,用一般的比濁法無法計數(shù)的微生物,,比如支原體等,因為支原體的液體培養(yǎng)物是透明的,,呈現(xiàn)為清亮透明紅色,,因此無法用比濁法來計數(shù),,由于支原體固體培養(yǎng)很困難,用cfu法也不容易計數(shù),,因此需要用特殊的計數(shù)方法,,即CCU法。它是以微生物在培養(yǎng)基中的代謝活力為指標(biāo),,來計數(shù)微生物的相對含量的,。