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人周期素依賴性激酶5（CDK5）檢測試劑盒用于人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中人周期素依賴性激酶5（CDK5）含量,。價格公道，現(xiàn)貨供應(yīng)。

人周期素依賴性激酶5(CDK5)檢測試劑盒

本試劑僅供研究使用

試驗(yàn)原理：

CDK5試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知CDK5濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將CDK5物素標(biāo)記的抗體同時溫育,。洗滌后,，加入親和素標(biāo)記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,，然后加入底物A,、B，和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中CDK5的活性濃度呈比例關(guān)系。

人周期素依賴性激酶5(CDK5)檢測試劑盒試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份（2-8℃保存）	96孔配置	48孔配置	配制
96/48份酶標(biāo)板	1塊板（96T）	半塊板（48T）	即用型
塑料膜板蓋	1塊	半塊	即用型
標(biāo)準(zhǔn)品：400ng/ml	1瓶（0.6ml）	1瓶（0.3ml）	按說明書進(jìn)行稀稀
空白對照	1瓶（1.0ml）	1瓶（0.5ml）	即用型
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液	1瓶（5ml）	1瓶（2.5ml）	即用型
生物素標(biāo)記的CDK5抗體	1瓶（6ml）	1瓶（3.0ml）	即用型
親和鏈酶素-HRP	1瓶（10ml）	1瓶（5.0ml）	即用型
洗滌緩沖液	1瓶（20ml）	1瓶（10ml）	按說明書進(jìn)行稀釋
底物A	1瓶（6.0ml）	1瓶（3.0ml）	即用型
底物B	1瓶（6.0ml）	1瓶（3.0ml）	即用型
終止液	1瓶（6.0ml）	1瓶（3.0ml）	即用型

自備材料

1．蒸餾水,。

2．加樣器：5ul,、10ul、50ul,、100ul,、200、500ul,、1000ul,。

3．振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

1．避免直接接觸終止液和底物A,、B,。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗,。

2．實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。

3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

人周期素依賴性激酶5(CDK5)檢測試劑盒操作注意事項(xiàng)

1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存,。

2．實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。

3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。

4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。

6．洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

7．底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。

8．加入試劑的順序應(yīng)*,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

9．按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。

樣品收集,、處理及保存方法

1,、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2,、血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。

3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。

4,、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

人周期素依賴性激酶5(CDK5)檢測試劑盒試劑的準(zhǔn)備

1．標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)備,，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：

400ng/ml	（6號標(biāo)準(zhǔn)品）	原倍濃度不用稀釋直接加入50ul,。
200ng/ml	（5號標(biāo)準(zhǔn)品）	100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100ng/ml	（4號標(biāo)準(zhǔn)品）	100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50ng/ml	（3號標(biāo)準(zhǔn)品）	100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
25ng/ml	（2號標(biāo)準(zhǔn)品）	100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12.5ng/ml	（1號標(biāo)準(zhǔn)品）	100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0ng/ml	（空白對照）	原始濃度不用稀釋直接加入50ul,。

2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟

1．使用前,，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差,。

2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時。

4．甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。

5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘,。

6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。

7．每孔加入底物A,、B各50ul,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘,。避免光照,。

8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。

9．在450nm波長處測定各孔的OD值。

性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng),。

3. 重復(fù)性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%。

4.局限性：6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到精確的結(jié)果,。

結(jié)果判斷 與分析

1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2,、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y）,，相應(yīng)的CDK5標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線,，樣品的CDK5含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,。

3,、檢測值范圍：0-400ng/ml

4,、敏感度： 1.0ng/mlxy-E13548 【中文名稱】：口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA試劑盒【英文名稱】：Non-structural proteins of FMD antibody detection kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13549 【中文名稱】：豬瘟抗原2板ELISA試劑盒【英文名稱】：2 swine fever antigen detection kit board kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13550 【中文名稱】：偽狂犬病毒gE2.0抗體診斷ELISA試劑盒【英文名稱】：Pseudorabies virus gE2.0 antibody diagnostic kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13551 【中文名稱】：藍(lán)耳病ELISA試劑盒【英文名稱】：Blue ear disease detection kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13552 【中文名稱】：圓環(huán)病毒IgGELISA試劑盒【英文名稱】：Circovirus IgG detection kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13553 【中文名稱】：狂犬病毒IgG抗體(RV-IgG)ELISA試劑盒【英文名稱】：Rabies virus IgG antibodies (RV-IgG) ELISA Kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13554 【中文名稱】：破傷風(fēng)IgG抗體(Tetanus IgG)ELISA試劑盒【英文名稱】：Tetanus IgG antibody (Tetanus IgG) ELISA Kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13555 【中文名稱】：*蛋白ELISA試劑盒【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13556 【中文名稱】：*白蛋白加合物 (AAA)ELISA試劑盒【英文名稱】：Aflatoxin albumin adduct (AAA) ELISA Kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13557 【中文名稱】：慶大霉素（Gentamicin，Gen）ELISA試劑盒【英文名稱】：Gentamicin (Gentamicin, Gen) ELISA kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13558 【中文名稱】：微囊藻毒素LR(MC-LR)ELISA試劑盒【英文名稱】：Microcystin-LR (MC-LR) ELISA kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13559 【中文名稱】：總*ELISA試劑盒【英文名稱】：ELISA kits total aflatoxin 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13560 【中文名稱】：總抗氧化能力（TAOC）ELISA試劑盒【英文名稱】：The total antioxidant capacity (TAOC) ELISA kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13561 【中文名稱】：S-腺苷甲硫氨酸ELISA試劑盒【英文名稱】：S-adenosylmethionine ELISA kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13562 【中文名稱】：菊粉（Inulin）ELISA試劑盒【英文名稱】：Inulin (Inulin) ELISA Kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13563 【中文名稱】：瓜氨酸（Citrulline）ELISA試劑盒【英文名稱】：Citrulline (Citrulline) ELISA Kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13564 【中文名稱】：1（TIMP-1）ELISA試劑盒【英文名稱】：1 (TIMP-1) ELISA Kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13565 【中文名稱】：丙酸睪酮ELISA試劑盒【英文名稱】：Propionate Testosterone ELISA kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13566 【中文名稱】：去氫甲睪酮ELISA試劑盒【英文名稱】：Testosterone ELISA kit dehydrogenase A 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13567 【中文名稱】：鹽酸ELISA試劑盒【英文名稱】：Sibutramine hydrochloride ELISA kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13568 【中文名稱】：荷爾蒙ELISA試劑盒【英文名稱】：Hormone ELISA kit 【靈敏度】：9.375pg/mL
xy-E13569 【中文名稱】：乙酰膽堿酶抑制劑ELISA試劑盒【英文名稱】：Acetylcholine inhibitors ELISA kit 【靈敏度】：9.375pg/mL

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