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人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA 試劑盒

本試劑僅供研究使用

試驗(yàn)原理：

ALG試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知ALG濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),。先將ALG和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育,。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,，然后加入底物A、B,，和酶結(jié)合物同時(shí)作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ALG的活性濃度呈比例關(guān)系,。

試劑盒內(nèi)容及其配制

自備材料

1．  蒸餾水,。

2．  加樣器：5ul、10ul,、50ul、100ul,、200、500ul,、1000ul。

3．  振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

1．  避免直接接觸終止液和底物A,、B,。一旦接觸到這些液體,，請(qǐng)盡快用水沖洗,。

2．  實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。

3．  不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA 試劑盒操作注意事項(xiàng)

1．  試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存。

2．  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存，以免變質(zhì)。

3．  不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4．  使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時(shí),，避免使用帶金屬部分的加樣器,。

5．  使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。

6．  洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。

7．  底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸，有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。

8．  加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。

9．  按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

樣品收集,、處理及保存方法

1,、  血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2,、  血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測(cè),。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3,、  細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。

4、  保存------如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA 試劑盒試劑的準(zhǔn)備

1．  標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻,。稀釋比例按下表中進(jìn)行：

2．  洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋,。

人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA 試劑盒操作步驟

1．  使用前,，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2．  根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。

3．  加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí),。

4．  甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。

5．  每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。

6．  甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。

7．  每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘,。避免光照。

8．  取出酶標(biāo)板,，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

9．  在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。

性能

1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。

2. 特異性：不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng),。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,。

4.局限性：6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到精確的結(jié)果。

結(jié)果 判 斷 與 分 析

1,、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2,、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的ALG標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X）,，做得相應(yīng)的曲線,，樣品的ALG含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3,、檢測(cè)值范圍：0-400ng/ml

4,、敏感度： 1.0ng/mlXYE691Mu 【中文名稱】：小鼠鞘氨醇1磷酸酯裂解酶1(SGPL1)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Sphingosine 1 Phosphate Lyase 1 (SGPL1)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYF235Mu 【中文名稱】：小鼠L-型電壓依賴鈣離子通道α1S亞基(CACNα1S)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1S Subunit (CACNa1S)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYF236Mu 【中文名稱】：小鼠L-型電壓依賴鈣離子通道α1C亞基(CACNα1C)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1C Subunit (CACNa1C)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYF237Mu 【中文名稱】：小鼠L-型電壓依賴性鈣離子通道α1D亞基(CACNα1D)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1D Subunit (CACNa1D)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYF238Mu 【中文名稱】：小鼠L-型電壓依賴鈣離子通道α1F亞基(CACNα1F)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1F Subunit (CACNa1F)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYF240Mu 【中文名稱】：小鼠N-型電壓依賴鈣離子通道α1B亞基(CACNα1B)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, N-Type, Alpha 1B Subunit (CACNa1B)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYF241Mu 【中文名稱】：小鼠R-型電壓依賴鈣離子通道α1E亞基(CACNα1E)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, R-Type, Alpha 1E Subunit (CACNa1E)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYF243Mu 【中文名稱】：小鼠T-型電壓依賴鈣離子通道α1H亞基(CACNα1H)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, T-Type, Alpha 1H Subunit (CACNa1H)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYF756Mu 【中文名稱】：小鼠過氧化還原酶6(PRDX6)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Peroxiredoxin 6 (PRDX6)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYG575Mu 【中文名稱】：小鼠溶質(zhì)載體家族30成員3(SLC30A3)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 3 (SLC30A3)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYG576Mu 【中文名稱】：小鼠溶質(zhì)載體家族30成員5(SLC30A5)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 5 (SLC30A5)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYG577Mu 【中文名稱】：小鼠溶質(zhì)載體家族30成員6(SLC30A6)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 6 (SLC30A6)  【靈敏度】：9.375pg/mL
XYH006Mu 【中文名稱】：小鼠丙糖磷酸異構(gòu)酶1(TPI1)ELISA試劑盒 【英文名稱】：ELISA Kit for Triosephosphate Isomerase 1 (TPI1)  【靈敏度】：9.375pg/mL