一、細胞基本屬性 |
細胞名稱 | Nalm6-LUC-puro(人B淋巴白血病細胞-熒光素酶標記(STR鑒定正確)) |
細胞別稱 | Nalm6-LUC-puro,;人B淋巴白血病細胞-LUC-puro,;人B淋巴白血病細胞-熒光素酶標記 |
種屬來源 | 人 |
組織來源 | 外周血 |
生長特性 | 懸浮生長 |
細胞形態(tài) | 淋巴細胞樣 |
puro藥篩濃度 | 該細胞puro藥篩濃度為0.5ug/ml,培養(yǎng)過程中可不用再添加puro,,如若擔心抗性隨著傳代時間降低,,可定期用0.2ug/ml濃度puro維持。 |
細胞代數(shù) | p3-p8 |
背景介紹 | Luciferase Nalm6細胞穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶,。該細胞株性狀穩(wěn)定,,培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持??捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照,,也可用于活體動物成像實驗。 該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因,。 該細胞由19歲患有急性淋巴細胞白血?。ˋLL)的19歲男子的外周血建立,在1976年復發(fā),。 |
Luciferase活性檢測 |  NALM6-LUC-PURO Luciferase檢測報告下載 |
STR鑒定位點 | 
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生物安全等級 | 1 |
細胞規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 |
支原體檢測 | 無 |
保藏機構 | DSMZ,; ACC-128 RCB; RCB1933 |
培養(yǎng)基 | 89%RPMI-1640+10% FBS+1%PS |
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃ |
凍存條件 | 無血清凍存液,,液氮儲存 |
細胞貨期 | 1-2周 |
運輸方式 | 復蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 |
供應限制 | 僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 |
特別說明 | 以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二,、細胞培養(yǎng)操作 |
收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 |
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收貨處理 | 觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁,,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài) | 收到細胞后,需立即轉入液氮凍存或直接復蘇 |
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傳代密度 | 細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng) | 第二天換液并檢查細胞密度 |
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傳代比例 | 傳代建議1:2傳代 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿,。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 | 一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 |
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傳代方法 | 方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心3-5min分鐘,棄去上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后輕輕吹勻,。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度,。 |
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注意事項 | 1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 2.因運輸問題,,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象,。 | 1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,,若已融化需直接離心細胞接種觀察,,若未融化可以將細胞按正常步驟保存; 2.為保證細胞的高存活率,,收到產(chǎn)品后,,請立即解凍復蘇細胞。 |
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到貨須知 | 1.收到細胞后,,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否揮發(fā),,細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。 2.靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),,記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。 3.由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決,。 4.仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子等,,確保細胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔,。 |
三.細胞凍存操作 |
凍存液配方 | 無血清凍存液,,液氮儲存 |
細胞密度 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為例 |
凍存方法 | a,、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,,1000 rpm條件下離心4 min,,棄去上清液,用PBS清洗一遍,,棄盡PBS,,然后進行細胞計數(shù)。 b,、根據(jù)細胞數(shù)量對應加入無血清細胞凍存液,,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,,注意凍存管做好標識。 c,、將凍存管放入-80℃冰箱,,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
注意事項 | 凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,,若有異常,,及時調(diào)整實驗方案 |
四、售后服務 |
重發(fā)標準 | 1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,,細胞丟失,、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,,重發(fā),; 2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,,重發(fā),; 3.收到細胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,,經(jīng)核實后,重發(fā),; 4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,,干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,絕大多數(shù)細胞未存活,,經(jīng)核實后,,重發(fā); 5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,,出現(xiàn)污染,,經(jīng)核實后,重發(fā),; 6.細胞活性問題,,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,,經(jīng)核實后,,重發(fā); 7.視具體情況而定,。 |
不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細胞污染,,不重發(fā); 2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā),; 3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā),; 4.細胞狀態(tài)不好,,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā); 5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,,不重發(fā),; 6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā),; 7.視具體情況而定,。 |