MDA-MB-231-LUC-GFP-PURO （人乳腺癌細胞）

細胞操作詳細步驟

                           --懸浮細胞

1.細胞復蘇

1.1準備一個T25的細胞培養(yǎng)瓶并做好標記,，預熱好的細胞培養(yǎng)基,，一支15ml離心管，離心管中加入4-5ml細胞培養(yǎng)基,。

1.2取出細胞凍存管,，在37度水浴中快速解凍，將管子擦干消毒后迅速拿回生物安全柜,。

1.3將細胞懸液轉移到加有培養(yǎng)基的離心管中,，1000轉離心5分鐘。

1.4倒掉上清,，加入培養(yǎng)基輕輕重懸細胞亦可先將細胞團彈散后加入培養(yǎng)基混勻,。

1.5將重懸好的細胞轉移到T25細胞培養(yǎng)瓶，補充培養(yǎng)基到5ml左右,，十字搖晃,，將細胞鋪勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2.細胞傳代

第一種方法：

2.1細胞密度達到2×10⁶細胞/ml時,，1000轉離心5分鐘收集細胞,，棄上清，加入新鮮培養(yǎng)基,，使細胞密度在1-3×10⁵細胞/ml.

第二種方法：

2.2細胞密度達到2×10⁶細胞/ml時,，將培養(yǎng)瓶中的細胞懸液分裝到新的培養(yǎng)瓶，并補充新鮮培養(yǎng)基,，使細胞密度在1-3×10⁵細胞/ml.

3.細胞凍存

將培養(yǎng)瓶中的細胞懸液轉移到離心管中,，1000轉離心5分鐘收集細胞，棄上清,，加入凍存液,，重懸細胞，并分裝到凍存管,，凍存密度1-2×10⁶細胞/ml,。將凍存管放入程序降溫盒,，并放到-80℃冰箱，過夜后將凍存管轉移到液氮保存,。

4.注意事項

4.1建議收到細胞后先用我們配套的培養(yǎng)基和血清,。收到活細胞的客戶培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基可回收使用，保存在4度可使用一周,。

4.2不同實驗室操作上會有些許差異,，為了避免細胞不適應，請先按照說明書推薦的方法和操作步驟培養(yǎng),，待細胞凍存后可根據(jù)自己的習慣操作看細胞是否能夠適應,。

4.3建議收到細胞后，前幾代及時凍存一些細胞,，并最好是可以多凍存幾個批次。

僅用于科研,，不能用于臨床診斷,！所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于人或動物的治療等任何其他用途,，不為任何個人提供產(chǎn)品和服務,。