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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號	XY-0684	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率,、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性,。

葡萄球菌屬通用PCR試劑盒

Staphylococcus spp.

產(chǎn)品及特點(diǎn)

葡萄球菌屬（Staphylococcus spp.）是一群革蘭氏陽性球菌,，因常堆聚成葡萄串狀,，故名。葡萄球菌是常見的化膿性球菌,，是醫(yī)院交叉感染的重要來源,，可能會導(dǎo)致患者全身多臟器化膿性感染，危及生命,。因此對葡萄球菌屬進(jìn) 行快速靈敏的診斷具有重要的意義,。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用,，用戶只需要提供病毒 DNA 模板,。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng),，只擴(kuò)增葡萄球菌屬,，但跟其他微生物無交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對照,，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研,。

葡萄球菌屬通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.0	1 mL（亮黃蓋）
試劑二	超純水	1 mL（藍(lán)色）
試劑三	葡萄球菌屬通用PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	葡萄球菌屬通用PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋）
試劑五	天凈沙核酸釋放劑試用裝	20 次（1 mL，綠蓋）
試劑六	使用手冊	1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存,，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置,，不要污染其他試劑,。

自備試劑樣品 DNA。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品,，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽性對照）,，一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對照）,。可以用 10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此作為 PC。另外用水作為 NC,。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取試劑盒兼容。

二,、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個(gè)樣品,，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對照和一個(gè) PCR 陰性對照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng),。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2個(gè) 樣品管	PCR陰性對照	PCR陽性對照
PCR MagicMix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
葡萄球菌屬通用 PCR 引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2個(gè)樣品DNA模板	各18 μL	-	-
PCR 陰性對照（水）	-	18 μL	-
PCR 陽性對照（葡萄球菌屬通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液）	-	-	18 μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過程	溫度	時(shí)間
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR反應(yīng) （35個(gè)循環(huán)）	95℃	30 sec
	55℃	30 sec
	72℃	60 sec
后延伸	72℃	10 min

三,、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物,。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),，陰性對照必須無任何擴(kuò)增,，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染,。