沙門氏菌通用PCR試劑盒

Salmonella spp.

產(chǎn)品及特點

沙門氏菌屬通用（Salmonella spp.）是一種常見的食源性致病菌引起沙 門氏菌病的,，屬腸桿菌科，革蘭氏陰性腸道桿菌,。按其抗原成分,，可分為甲、 乙,、丙,、丁、戊等群,。其中與人體疾病有關(guān)的主要有甲組的副傷寒甲桿菌,，乙 組的副傷寒乙桿菌和鼠傷寒桿菌，丙組的副傷寒丙桿菌和豬霍亂桿菌,，丁組的 傷寒桿菌和腸炎桿菌等,。除傷寒桿菌、副傷寒甲桿菌和副傷寒乙桿菌引起人類 的疾病外,，大多數(shù)僅能目引起家畜,、鼠類和禽類等動物的疾病，但有時也可污 染人類的食物而引起食物中毒,。引起的中毒病例在世界各地的食物中毒病例中 所占數(shù)量比例非常高,。在我國，70-80%細(xì)菌性食物中毒事件是由沙門氏菌引 起的,，沙門氏菌的檢測已成為食品質(zhì)量安全監(jiān)控的必檢衛(wèi)生指標(biāo),。因此快速靈 敏檢測沙門氏菌具有重要的意義，本試劑盒就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā),， 它具有下列特點： 

1. 即開即用,，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,，專一性強(qiáng),，只擴(kuò)增沙門氏菌，包括甲到戊群的沙門氏 菌,。但跟非沙門氏菌無交叉反應(yīng),。 

3. 提供陽性對照,，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研,。

沙門氏菌通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存,，保存期限為一年,。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑,。 

自備試劑 樣品 DNA,。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品,，必須設(shè)置 N+2 個提取,，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）,?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC,。另外用水作為 NC,。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容,。 

二,、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng),。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三,、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增,，否則實 驗無效,。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染,。