豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-PCR試劑盒返回列表頁

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產(chǎn)品型號50次

品牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地上海

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更新時(shí)間：2020-08-10 17:09:56瀏覽次數(shù)：703次

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產(chǎn)品分類品牌分類

PCR試劑盒: PCR-染料法 PCR-探針法

全部產(chǎn)品列表

產(chǎn)品簡介

供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號	XY-0582	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度,、更高的擴(kuò)增特異性,。

豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒,，根據(jù)其理化性質(zhì)分 α,、β,、γ,、未分類皰疹病毒四個(gè)亞科,。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛，可感染人類和其他脊椎動物,。在自然界廣泛存在,，主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織，例如：皮膚,、粘膜和神經(jīng)組織,。

詳情介紹

豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-PCR試劑盒

Porcine Endogenous Retrovirus(PERV)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒是嵌在細(xì)胞內(nèi)基因組的病毒，在豬身體里不會有毒性,。異種病毒傳播典型的例子就是艾滋病病毒從靈長類動物傳播到人類,。因此，內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒成為人體移植利用豬器官面臨的一個(gè)重大醫(yī)療風(fēng)險(xiǎn)問題,。本產(chǎn)品根據(jù) PCR 原理開發(fā),，可用于科研領(lǐng)域快速檢測豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒。它具有下列特點(diǎn)：

1. 一站式,，用于不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種成分,，包括引物和對照。

2. 根據(jù)豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒的保守基因序列設(shè)計(jì)的引物，具有良好的特異性,。

3. 靈敏度可以達(dá)到 1000 拷貝/反應(yīng),。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù)，RT 和 PCR 兩步在一個(gè)試管內(nèi)完成,，不需要中間轉(zhuǎn)移樣品,，降低了操作誤差和可能的污染。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR,。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研,，不能用于臨床。

豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成份	規(guī)格
試劑一	5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	200 μL（橘黃蓋）
試劑二	MMLV-Taq Mix	75 μL（紅蓋）
試劑三	超純水	1 mL（亮黃蓋）
試劑四	豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒 RT-PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑五	豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒 RT-PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋）
試劑六	天凈沙核酸釋放劑（試用裝）	20 次（1mL,，綠蓋）
試劑七	使用手冊	1 份）

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存，保存期限為 12 個(gè)月,。收到貨后陽性對照需要跟其他成分分開放置,，因?yàn)槠淙菀孜廴酒渌煞郑斐杉訇栃浴?nbsp;

自備試劑 樣品 RNA

使用方法 一,、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品,，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽性對照）,，一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對照）,。可以用 10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照,；用水作為制備的陰性對照,。制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 RNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提取試劑盒兼容,。

二、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系）

3. 如果有 N+2 個(gè)樣品,，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管（額外增加的兩個(gè)管一個(gè)是 RT-PCR 陽性對照,，另一個(gè)是 RT-PCR 陰性對照）并按照下表在 PCR 管中加入下列成分：

成分	樣品	陽性對照	陰性對照
5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	各 4 μL	4 μL	4 μL
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒 RT-PCR 引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2 個(gè)制備的 RNA 樣品	各12.5 μL
超純水		12.5 μL
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒 RT-PCR 陽性對照的 100 倍稀釋液	L		12.5 μL
MMLV-Taq Mix	1.5 μL	1.5 μL	1.5 μL

4. 上機(jī)進(jìn)行 RT-PCR，RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:

過程	溫度	時(shí)間
逆轉(zhuǎn)錄	42℃	30 min
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR 反應(yīng) （35 個(gè)循環(huán)）	95℃	30 sec
	53℃	30 sec
	72℃	20 sec
延伸	72℃	7 min

5. 瓊脂糖電泳檢測擴(kuò)增效果,。如果陰性對照有擴(kuò)增產(chǎn)物或陽性對照無擴(kuò)增產(chǎn)物,，則說明實(shí)驗(yàn)失敗，需要分析實(shí)驗(yàn)失敗的原因,。只有在陰性對照沒有擴(kuò)增產(chǎn)物,、陽性對照有 122bp 預(yù)期的擴(kuò)增產(chǎn)物的情況下，才有必要分析樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，如果有擴(kuò)增產(chǎn)物則為陽性,，如果無則為陰性,。