兔巴氏桿菌PCR試劑盒

Parvovirus B19(PVB19)

產(chǎn)品及特點

兔巴氏桿菌病兔巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌引起的,，家兔中較常發(fā)生， 一般無季節(jié)性,，以冷熱交替,、氣溫驟變，悶熱,、潮濕多雨季節(jié)發(fā)生較多,。病兔 的糞便、分泌物可以不斷排出有毒力的病菌,，污染飼料,、飲水,、用具和外界環(huán) 境，經(jīng)消化道而傳染給健康兔,，或由咳嗽,、噴嚏排出病菌，通過飛沫經(jīng)呼吸道 而傳染,，吸血昆蟲的媒介和皮膚,、粘膜的傷口也可發(fā)生傳染。臨診特征是鼻炎,、 地方流行性肺炎,、全身性敗血癥、中耳炎,、結(jié)膜炎,、子宮積膿、睪丸炎等不同 病型,。此病是引起 9 周齡-6 月齡兔死亡的一種主要的傳染病,。本產(chǎn)品就是為 此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點： 

1. 即開即用,，用戶只需要提供病毒 DNA 模板,。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強,，只擴增兔巴氏桿菌,，不跟其他病毒發(fā)生 交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對照,，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研

兔巴氏桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸,，-20℃保存,，保存期限為 12 個月。

自備試劑   樣品 DNA,。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品,，必須設(shè)置 N+2 個提取,，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）,?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此 作為 PC。另外用水作為 NC,。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二,、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品,，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng),。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三,、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物,。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),，陰性對照必須無任何擴增,，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染,。