新型布尼亞病毒RT-PCR試劑盒

Novel Bunyavirus

產品及特點

新型布尼亞病毒,，衛(wèi)生部門從蜱蟲中毒者體內分離出的病毒?；驅⒈徽J定為 一種新型病毒,。從目前來看，這一病毒主要由蜱傳播,，且可以治療,，病死率很低。 目前未發(fā)現(xiàn)人傳染人的病例,。布尼亞病毒自然感染見于許多脊椎動物和節(jié)肢動物 (蚊,、蜱、白蛉等),，可感染小鼠,，并能在一些哺乳類、鳥類和蚊細胞培養(yǎng)中生長; 對人可引起類似流感或登革熱的疾病,、出血熱(立夫特谷熱和克里米亞─剛果出血 熱等)及腦炎(加利福尼亞腦炎),。有蚊媒、蜱媒,、白蛉媒 3 種傳播類型,。本公司開 發(fā)了本產品，可用于在科研領域快速定量檢測新型布尼亞病毒,。它具有下列特點：

1. 一站式,，用于不需要單獨準備每種成分，包括引物和對照,。

2. 根據(jù)據(jù)新型布尼亞病毒的保守基因序列設計的引物,，具有良好的特異性。

3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應,。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術,，RT 和 PCR 兩步在一個試管內完成，不需要中間 轉移樣品,，降低了操作誤差和可能的污染,。

5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

6. 本產品只能用于科研，不能用于臨床,。

新型布尼亞病毒RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存,，保存期限為 12 個月,。收到貨后陽性對照需要跟其他成分 分開放置，因為其容易污染其他成分,，造成假陽性,。 

自備試劑 樣品 RNA

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品,，必須設置 N+2 個提取,，多出的一個是 PC（樣品制備陽性 對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）,?？梢杂?10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照；用水作為制備的陰性對照,。 制備所得成為樣品 RNA,。

2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提 取試劑盒兼容,。

二,、設置 RT-PCR 反應（20μL 體系）

3. 如果有 N+2 個樣品，則標記 N+4 個 PCR 管（額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照,，另一個是 RT-PCR 陰性對照）并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分：

4. 上機進行 RT-PCR,，RT-PCR 反應參數(shù)為:

5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產物或陽性對照無擴增產物,， 則說明實驗失敗,，需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產物,、 陽性對照有 122bp 預期的擴增產物的情況下,，才有必要分析樣品的實驗結果， 如果有擴增產物則為陽性,，如果無則為陰性,。