絲狀支原體絲狀亞種SC型PCR試劑盒

Mycoplasma mycoides subsp(mycoides SC)

產品及特點

絲狀支原體絲狀亞種 SC 型（Mycoplasma mycoides subsp mycoides SC）只感染牛屬反芻動物,，即主要是牛、瘤牛和牦牛,，會引起牛傳染性胸膜肺 炎,，是一種高度接觸性傳染病，以滲出性纖維素性肺炎和漿液纖維素性胸膜肺 炎為特征,。初期病變以小葉性支氣管肺炎為特征,。肺炎灶充血、水腫,，呈鮮紅 色或紫紅色,。中期呈漿液性纖維素性胸膜肺炎，病肺腫大,、增重,，灰白色，多 為一側性,，以右側較多,，多發(fā)生在膈葉,，也有在心葉或尖葉者,。該疾病往往會 給養(yǎng)殖業(yè)帶來較大的經濟損失，因此絲狀支原體絲狀亞種 SC 型的檢測具有重 要的意義,。本試劑盒是根據 PCR 原理開發(fā),，它具有下列特點： 

1. 即開即用，用戶只需要提供細菌 DNA 模板,。 

2. 引物經過精心優(yōu)化,，專一性強，只擴增絲狀支原體絲狀亞種 SC 型,。

3. 提供陽性對照,，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產品只能用于科研,。

絲狀支原體絲狀亞種SC型PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存,，保存期限為一年,。陽性對照需要單獨放置,，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA,。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取,，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照）,，一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此 作為 PC。另外用水作為 NC,。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場上大多數寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二,、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品,，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應,。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應：

三,、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物,。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),，陰性對照必須無任何擴增,，否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染,。