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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號(hào)	XY-0483	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率,、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。

改良安卡拉痘苗病毒PCR試劑盒

Modified Vaccinia Virus Ankara (MVA)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

改良型痘苗病毒安卡拉株( modified vaccinia virus Ankara,MVA)是人類(lèi)在尋求痘苗病毒作為天花疫苗的過(guò)程中獲得的高度減毒的痘苗毒株，MVA 來(lái) 源于一個(gè) 土耳其的痘病毒毒株 (chorioallantois vaccinia virus Ankara,CVA),CVA 在雞成纖維細(xì)胞中傳代 570 代后得到 MVA,。本產(chǎn)品就是為快速靈敏檢測(cè)改良型痘苗病毒安卡拉株,，根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用,，用戶只需要提供病毒 DNA 模板,。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng),，只擴(kuò)增改良型痘苗病毒安卡拉株,，與其他病毒沒(méi)有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研

改良安卡拉痘苗病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號(hào)	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃蓋）
試劑三	改良型痘苗病毒安卡拉株 PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	改良型痘苗病毒安卡拉株P(guān)CR 陽(yáng)性對(duì)	50 μL（黃蓋））
試劑五	天凈沙核酸釋放劑試用裝	20 次（1mL，綠蓋）
試劑六	使用手冊(cè)	1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存,，保存期限為一年,。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑,。

自備試劑樣品 DNA,。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品,，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取,，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）,?？梢杂?10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為 PC,。另外用水作為 NC,。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲(chóng) DNA 提取試劑盒兼容,。

二,、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照,，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng),。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2個(gè) 樣品管	PCR陰性對(duì)照	PCR陽(yáng)性對(duì)照
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
改良型痘苗病毒安卡拉株PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板	各 18 μL
PCR 陰性對(duì)照（水）		18 μL	-
PCR 陽(yáng)性對(duì)照（改良型痘苗病毒安卡拉株 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 1000 倍稀釋液）	-		18 μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過(guò)程	溫度	時(shí)間
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR反應(yīng) （35個(gè)循環(huán)）	95℃	15 sec
	55℃	15 sec
	72℃	60 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物,。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增,，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效,。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染,。