伊氏李斯特菌PCR試劑盒

Listeria ivanovii

產(chǎn)品及特點(diǎn)

伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii)是引起人獸共患伊氏李斯特菌病的病原菌,，該菌感染宿主中樞神經(jīng)系統(tǒng)是導(dǎo)致高死亡率的主要原因，較容易感染的動(dòng)物是綿羊,，所以該菌又被稱(chēng)為綿羊伊氏李斯特菌,，感染該病菌會(huì)給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)較大的經(jīng)濟(jì)損失，因此伊氏李斯特菌的快速準(zhǔn)確鑒定對(duì)該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用,。本試劑盒根據(jù)熒光定量PCR原理開(kāi)發(fā),，它具有下列特點(diǎn)：

1.即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供細(xì)菌DNA模板,。
2.引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,，專(zhuān)一性強(qiáng)，只擴(kuò)增伊氏李斯特菌,。
3.提供陽(yáng)性對(duì)照,，便于區(qū)分假陰性樣品,。
4.PCR mix中含上樣染料,，PCR后可以直接上樣電泳,。
5.本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,。
6.本產(chǎn)品只能用于科研,。

伊氏李斯特菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存,，保存期限為一年,。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置,，不要污染其他試劑。

自備試劑 樣品 DNA,。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取,，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照）,，一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此 作為 PC,。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲(chóng) DNA 提取 試劑盒兼容,。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照,，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三,、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增,，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效,。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染,。