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產品型號50次

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所在地上海

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更新時間：2020-08-05 17:14:10瀏覽次數：496次

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PCR試劑盒: PCR-染料法 PCR-探針法

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產品簡介

供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號	XY-0440	應用領域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴增效率,、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性,。

嗜肺軍團菌PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒，根據其理化性質分 α,、β,、γ、未分類皰疹病毒四個亞科,。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛,，可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在,，主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織,，例如：皮膚、粘膜和神經組織,。

詳情介紹

嗜肺軍團菌PCR試劑盒

legionella pneumophila

產品及特點

嗜肺軍團菌（legionella pneumophila）是一種有鞭毛,，革蘭氏陰性，軍團菌屬多形態(tài)性的短小球桿菌,。為胞內寄生菌,。嗜肺軍團菌引起軍團病，該病流行于夏秋季,，主要通過吸入帶菌飛沫而感染,。常見的感染來源為污染的空調和供水系統(tǒng)。軍團病主要有流感樣型和肺炎型兩種臨床類型,，流感樣型愈后良好,，肺炎型死亡率較高（大于 15%）。因此對嗜肺軍團菌進行快速靈敏的診斷具有重要的意義,。本產品就是為此目的根據 PCR 原理開發(fā)的產品,，它具有下列特點：

1.即開即用，用戶只需要提供細菌DNA模板,。
2. 引物經過精心優(yōu)化,，專一性強，只擴增嗜肺軍團菌,，但跟其他細菌無交叉反應,。
3.提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品,。
4.PCR mix中含上樣染料,，PCR后可以直接上樣電泳。
5.本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次。
6.本產品只能用于科研,。

嗜肺軍團菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.	1 mL（亮黃蓋）
試劑二	超純水	1 mL（藍色））
試劑三	嗜肺軍團菌PCR引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	嗜肺軍團菌PCR陽性對照	50 μL（黃蓋））
試劑五	天凈沙DNA釋放劑試用裝	50次（試用裝）
試劑六	使用手冊	1 份

運輸及保存 低溫運輸,，-20℃保存，保存期限為一年,。陽性對照需要單獨放置,，不要污染其他試劑。

自備試劑樣品 DNA,。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取,，多出的一個是 PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）,?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為 PC,。另外用水作為 NC,。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數寄生蟲 DNA 提取試劑盒兼容,。

二,、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照,，故需要設置 N+4 個反應,。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2個樣品管	PCR陰性對照	PCR陽性對照
PCR MagicMix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
嗜肺軍團菌 PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2個樣品DNA模板	各18 μL	-	-
樣品制備陰性對照（超純水）	-	18 μL	-
樣品制備陽性對照（嗜肺軍團菌陽性對照的 100 倍稀釋液）	-	-	18 μL

4. 按下表設置 PCR 反應：

過程	溫度	時間
預變性	95℃	5 min
PCR反應（35個循環(huán)）	95℃	15 sec
	58℃	15 sec
	72℃	60 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產物,。電泳檢測 PCR 產物,。本產品提供的 PCR Mix 在擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產物陽性對照必須有 551bp 大小的條帶出現,，陰性對照必須無任何擴增，否則實驗無效,。對沒有擴增產物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。