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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號	XY-0412	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度,、更高的擴增特異性,。

人類嗜T淋巴細胞病毒2型RT-PCR試劑盒

Human T-cell Lymphoma Virus 2(HTLV-2)

產(chǎn)品及特點

人類嗜 T 淋巴細胞病毒 2 型（Human T-lymphotropic Virus 2,HTLV-2）是一種感染后可導(dǎo)致血癌或其他轉(zhuǎn)移癌的 RNA 病毒，HTLV-2 和 HTLV-I 同源性達到 70%,，也是愛滋病毒 (HIV-I) 的遠親,。該病毒在體內(nèi)主要感染 CD4+ T 淋巴細胞，可引起成人 T 淋巴細胞白血病/淋巴瘤等疾病,，主要通過輸血,、針頭,、性行為、母子傳染,，對人類健康構(gòu)成威脅,，因此快速靈敏檢測 HTLV-2 病毒具有重要意義。本試劑盒根據(jù) RT-PCR 原理開發(fā),，它具有下列特點：

1. 即開即用,，用戶不需要單獨準(zhǔn)備各種成分。

2. 根據(jù) HTLV-2 保守序列設(shè)計,，專一性強,。

3. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù),，RT 和 PCR 兩步在一個試管內(nèi)完成,，不需要中間轉(zhuǎn)移樣品，降低了操作誤差和可能的污染,。

4. 提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照,，便于分析實驗結(jié)果。

5. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應(yīng),。

6. 本產(chǎn)品足夠 50 次 30μL 體系的 RT-PCR,。

7. 本產(chǎn)品只能用于科研，不能用于臨床

人類嗜T淋巴細胞病毒2型RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成份	規(guī)格
試劑一	5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	200 μL（橙蓋）
試劑二	MMLV-Taq Mix	75 μL（紅蓋）
試劑三	超純水	1 mL（藍蓋）
試劑四	HTLV-2 RT-PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑五	HTLV-2 RT-PCR 陽性對照（1× 10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋）
試劑六	天凈沙核酸釋放劑（試用裝）	20 次（1mL,，綠蓋）
試劑七	使用手冊	1 份）

運輸及保存 低溫運輸,，-20℃保存，保存期限為 12 個月,。收到貨后陽性對照需要跟其他成分分開放置,，因為其容易污染其他成分，造成假陽性,。

自備試劑 樣品 RNA

使用方法 一,、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取,，多出的一個是 PC（樣品制備陽性對照）,，一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照,；用水作為制備的陰性對照。制備所得成為樣品 RNA,。

2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提取試劑盒兼容。

二,、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系）

3. 如果有 N+2 個樣品,，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管（額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照,，另一個是 RT-PCR 陰性對照）并按照下表在 PCR 管中加入下列成分：

成分	樣品	陽性對照	陰性對照
5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	各 4 μL	4 μL	4 μL
HTLV-2 RT-PCR 引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2 個制備的 RNA 樣品	各12.5 μL
HTLV-2 RT-PCR 陽性對照 10000 倍稀釋液			12.5 μL
MMLV-Taq Mix	1.5 μL	1.5 μL	1.5 μL

4. 上機進行 RT-PCR，RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:

過程	溫度	時間
逆轉(zhuǎn)錄	42℃	30 分鐘
預(yù)變性	95℃	5 分鐘
PCR 反應(yīng) （35 個循環(huán)）	95℃	40 秒
	55℃	30 秒
	72℃	40 秒
延伸	72℃	5 分鐘

5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果,。如果陰性對照有擴增產(chǎn)物或陽性對照無擴增產(chǎn)物,，則說明實驗失敗，需要分析實驗失敗的原因,。只有在陰性對照沒有擴增產(chǎn)物,、陽性對照有 122bp 預(yù)期的擴增產(chǎn)物的情況下，才有必要分析樣品的實驗結(jié)果,，如果有擴增產(chǎn)物則為陽性,，如果無則為陰性。