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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號	XY-0410	應用領域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴增效率,、更高的擴增靈敏度,、更高的擴增特異性。

人多瘤病毒7PCR試劑盒

Human Polyomavirus 7（HPyV7）

產(chǎn)品及特點

人多瘤病毒 7(Human Polyomavirus 7, HPyV7)可以誘發(fā)多個部位或器官發(fā)生肉瘤或癌癥,，多瘤病毒感染不同的靶器官并導致神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng),、泌尿生殖系統(tǒng)及消化系統(tǒng)等疾病,，該病毒是在健康者皮膚內(nèi)檢測到的,，偶見于免疫缺陷病人和健康人的體液和分泌物。目前,，對該病毒的流行病學特點、發(fā) 病機理和臨床表現(xiàn)等方面的了解還不多，急需解決的一個問題是建立實驗室診斷方法,，因此檢測人多瘤病毒 7 的 DNA 具有重要意義,。本產(chǎn)品具有下列特點：

1. 即開即用,，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,，專一性強，只擴增人多瘤病毒 7，與其他病毒沒有交叉反應,。

3. 提供陽性對照,，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研,。

人多瘤病毒7PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.	1 mL（亮黃蓋）
試劑二	超純水1 mL（藍色）	1 mL（藍色）
試劑三	人多瘤病毒 7 PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	人多瘤病毒 7 PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋））
試劑五	天凈沙核酸釋放劑試用裝	20 次（1mL，綠蓋）
試劑六	使用手冊	1 份

運輸及保存 低溫運輸,，-20℃保存,，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,，不要污染其他試劑,。

自備試劑樣品 DNA。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品,，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽性對照）,，一個是 NC（樣品制備陰性對照）,。可以用 10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為 PC,。另外用水作為 NC,。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取試劑盒兼容,。

二,、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照,，故需要設置 N+4 個反應,。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2個樣品管	PCR陰性對照	PCR陽性對照
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
人多瘤病毒 7PCR 引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 個樣品 DNA 模板	各 18 μL
PCR 陰性對照（水）		18 μL	-
PCR 陽性對照（人多瘤病毒 7 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液）	-		18 μL

4. 按下表設置 PCR 反應：

過程	溫度	時間
預變性	95℃	5 min
PCR反應（35個循環(huán)）	95℃	15 sec
	54℃	15 sec
	72℃	10 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物,。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴增結束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),，陰性對照必須無任何擴增，否則實驗無效,。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。