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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號(hào)	XY-0393	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度,、更高的擴(kuò)增特異性,。

人皰疹病毒8型PCR試劑盒

Human Herpesvirus-8(HHV-8)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

人皰疹病毒 8 型（Human Herpesvirus-8,，HHV-8) 會(huì)引起人類的原發(fā) 和繼發(fā)感染,，原發(fā)感染在兒童中多見(jiàn),，水痘的出疹突發(fā)，常出現(xiàn)紅色皮疹或斑疹,，繼續(xù)發(fā)展為成串水皰,、膿皰，后結(jié)痂,。病情一般較輕,，但偶可并發(fā)間質(zhì) 性肺炎和感染后腦炎。該病毒對(duì)人體健康造成嚴(yán)重?fù)p害,，因此快速檢測(cè)人皰疹病毒 8 型具有重要意義,。本試劑盒根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用,，用戶只需要提供病毒 DNA 模板,。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng),，只擴(kuò)增人皰疹病毒 8 型,，，與其他病毒沒(méi)有交叉反應(yīng),。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研,。

人皰疹病毒8型PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號(hào)	成分	規(guī)格
試劑一	2×PCR MagicMix 3.0	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（本色蓋）
試劑三	人皰疹病毒 8 型 PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	人皰疹病毒 8 型 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋）
試劑六	天凈沙核酸釋放劑（試用裝）	20 次（1 mL,，綠蓋）
試劑五	使用手冊(cè)	1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存,，保存期限為一年,。人皰疹病毒 6 型 PCR 陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑,。

自備試劑樣品 DNA,。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品,，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取,，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）,?？梢杂?10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為 PC。另外用水作為 NC,。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲(chóng) DNA 提取試劑盒兼容。

二,、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng),。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2個(gè) 樣品管	PCR陰性對(duì)照	PCR陽(yáng)性對(duì)照
PCR MagicMix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
人皰疹病毒 8 型 PCR 引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板	各18 μL	-	-
PCR 陰性對(duì)照（水）	-	18 μL	-
PCR 陽(yáng)性對(duì)照（人皰疹病毒 8 型 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 10000倍稀釋液）	-	-	18 μL

4. 按下列 PCR 參數(shù)進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增：

過(guò)程	溫度	時(shí)間
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR反應(yīng) （35個(gè)循環(huán)）	95℃	30 sec
	55℃	30 sec
	72℃	60 sec
后延伸	72℃	10 min

三,、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物,。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增,，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效,。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。