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當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次人皰疹病毒6型PCR試劑盒
產(chǎn)品型號(hào)50次
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時(shí)間:2020-08-03 14:24:35瀏覽次數(shù):481次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號(hào) | XY-0385 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率,、更高的擴(kuò)增靈敏度,、更高的擴(kuò)增特異性。 |
人皰疹病毒6型PCR試劑盒
Human Herpesvirus-6(HHV-6)
產(chǎn)品及特點(diǎn)
人皰疹病毒 6 型(Human Herpesvirus-6,HHV-6)是從淋巴增生性疾病和艾 滋病患者淋巴細(xì)胞中培養(yǎng)獲得的一種新病毒,可通過唾液飛沫及密切接觸(如接 吻,,共用餐,、飲器具等)、輸血,。除免疫低下(如先天性免疫缺 陷,、艾滋病,、長期服用免疫抑制劑等)外,絕大多數(shù)人感染后終身都不會(huì)產(chǎn)生明 顯癥狀,;免疫低下者,,如 HIV 感染者,當(dāng)人體特異性免疫被削弱至一定程度時(shí),, 潛伏的病毒可被激活并產(chǎn)生急性感染癥狀,,此時(shí)會(huì)出現(xiàn)間質(zhì)性肺炎、腦炎,、腦膜 炎,、肝炎及多器官衰竭等癥狀,活化的病毒可大規(guī)模感染 T 淋巴細(xì)胞,,使免疫功 能進(jìn)一步削弱,,該病毒對(duì)人體健康有較大影響,因此檢測人皰疹病毒 6 型 DNA 具有重要意義,。本產(chǎn)品就是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的,、檢測此病毒的試劑盒。本產(chǎn)品 具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,,用戶只需要提供病毒 DNA 模板,。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),,只擴(kuò)增人皰疹病毒 6 型病毒 DNA,,與其他病 毒沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對(duì)照,,便于區(qū)分假陰性樣品,。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳,。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,,但只能用于科研,。
人皰疹病毒6型PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號(hào) | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | 2×PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑三 | 人皰疹病毒 6 型 PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 人皰疹病毒 6 型 PCR 陽性對(duì)照 (1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋)
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試劑五 | 使用手冊(cè) | 1 份 |
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存,保存期限為一年,。人皰疹病毒 6 型 PCR 陽性對(duì)照需要單 獨(dú)放置,,不要污染其他試劑。
自備試劑 樣品 DNA,。
使用方法 一,、樣品 DNA 的制備
1. 如果有 N 個(gè)樣品,必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取,,多出的一個(gè)是 PC(樣品制備陽 性對(duì)照),,一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照),。可以用 10μL 陽性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此 作為 PC,。另外用水作為 NC。
2. 用自選方法純化樣品的 DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容,。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,,在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照,,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | N+2個(gè) 樣品管 | PCR陰性對(duì)照 | PCR陽性對(duì)照 |
PCR MagicMix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
人皰疹病毒6型通用 PCR 引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板 | 各18 μL | - | - |
PCR 陰性對(duì)照(水) | - | 18 μL | - |
PCR 陽性對(duì)照 10000 倍稀釋液 | - | - | 18 μL |
4. 按下列 PCR 參數(shù)進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增:
過程 | 溫度 | 時(shí)間 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min |
PCR反應(yīng) (35個(gè)循環(huán)) | 95℃ | 15 sec |
55℃ | 15 sec | |
72℃ | 30 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三,、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,,不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增,,否則實(shí) 驗(yàn)無效,。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染,。
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