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上海信裕生物科技有限公司
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當前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次漢坦病毒通用RT-PCR試劑盒

漢坦病毒通用RT-PCR試劑盒

參   考   價: 1990 1790

訂  貨  量: 1-4  臺 ≥5  臺

具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時間:2020-08-03 10:21:28瀏覽次數(shù):416次

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供貨周期 一周 規(guī)格 50T
貨號 XY-0335 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農林牧漁
主要用途 熒光定量PCR具有更高的擴增效率,、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性,。
漢坦病毒通用RT-PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒,,根據(jù)其理化性質分 α、β,、γ,、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛,,可感染人類和其他脊椎動物,。在自然界廣泛存在,主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織,,例如:皮膚,、粘膜和神經(jīng)組織。

漢坦病毒通用RT-PCR試劑盒

Hantavirus(HV)

產(chǎn)品及特點

漢坦病毒歸屬布尼亞病毒科,,是一種有包膜分節(jié)段的負鏈 RNA 病毒,,基因組 包括 L、M,、S 3 個片段,,分別編碼 L 聚合酶蛋白、G1 和 G2 糖蛋白,、核蛋白,。 漢坦病毒可兩種:引起漢坦病毒肺綜合征(HPS),另一種引起漢坦病毒腎綜合 征出血熱(HFRS),。前者主要流行于美國,,在阿根廷、巴西,、巴拉圭,、玻利維 亞以及德國也發(fā)現(xiàn)了病例。本產(chǎn)品根據(jù) PCR 原理開發(fā),,可用于科研領域快速檢 測漢坦病毒,。它具有下列特點:

1. 一站式,用于不需要單獨準備每種成分,,包括引物和對照,。

2. 根據(jù)漢坦病毒的保守基因序列設計的引物,具有良好的特異性。

3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應,。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術,,RT 和 PCR 兩步在一個試管內完成,不需要中間 轉移樣品,,降低了操作誤差和可能的污染,。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研,,不能用于臨床,。

漢坦病毒通用RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號

成  份

規(guī)格

試劑一

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

200 μL(橘黃蓋)

試劑二

MMLV-Taq Mix

75 μL(紅蓋)

試劑三

超純水 

1 mL(亮黃蓋)

試劑四

漢坦病毒 RT-PCR 引物 混合液 

100 μL(白蓋)

試劑五

漢坦病毒 RT-PCR 陽性 對照(1×10E8 拷貝/μL) 

50 μL(黃蓋)

試劑六 天凈沙核酸釋放劑(試用裝) 20 次(1mL,綠蓋)
試劑七

使用手冊 

1 份

運輸及保存 低溫運輸,,-20℃保存,,保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分 分開放置,,因為其容易污染其他成分,,造成假陽性。 

自備試劑 樣品 RNA

使用方法 一,、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品,,必須設置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽性 對照),,一個是 NC(樣品制備陰性對照),。可以用 10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照,;用水作為制備的陰性對照,。 制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提 取試劑盒兼容。

二,、設置 RT-PCR 反應(20μL 體系)

3. 如果有 N+2 個樣品,,則標記 N+4 個 PCR 管(額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照,另一個是 RT-PCR 陰性對照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分:

成分

樣品

陽性對照

陰性對照

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

各 4 μL

4 μL

4 μL

漢坦病毒通用 RT-PCR 引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2 個制備的 RNA 樣品

各12.5 μL

 

 

超純水 

 

12.5 μL

 

漢坦病毒通用 RT-PCR 陽性對照 的 100 倍稀釋液

 L

 

12.5 μL

 MMLV-Taq Mix 1.5 μL  1.5 μL 1.5 μL

4. 上機進行 RT-PCR,,RT-PCR 反應參數(shù)為:

過程

溫度

時間

逆轉錄 

42℃

30 min

預變性

95℃  

5 min

PCR 反應 (35 個循環(huán))

95℃ 

30 sec

53℃ 

30 sec

72

20 sec

 延伸  72 7 min

5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果,。如果陰性對照有擴增產(chǎn)物或陽性對照無擴增產(chǎn)物, 則說明實驗失敗,,需要分析實驗失敗的原因,。只有在陰性對照沒有擴增產(chǎn)物、 陽性對照有 122bp 預期的擴增產(chǎn)物的情況下,,才有必要分析樣品的實驗結果,, 如果有擴增產(chǎn)物則為陽性,如果無則為陰性,。

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