鏈球菌A組PCR試劑盒

Group A Streptococcus spp.(GAS)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

A 組鏈球菌（GAS）又稱化膿性鏈球菌，是人類細(xì)菌感染中重要的病原 之一,。GAS 可侵及人體的任何部位,，但以上呼吸道感染常見(jiàn)，其次是皮膚軟 組織感染,。GAS 可引起化膿性疾病及非化膿性并發(fā)癥兩類疾病,。GAS 也是變 反應(yīng)性疾病風(fēng)濕熱和急性腎小球腎炎的間接原因。近年來(lái)由 GAS 所引起的嚴(yán) 重感染,，侵襲性 A 組鏈球菌感染發(fā)病率的增長(zhǎng)及其所致嚴(yán)重后果,，也引起了人 們對(duì)該類細(xì)菌感染更大的關(guān)注。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)檢測(cè)鏈球菌 A 組 的試劑盒,，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用,，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,，專一性強(qiáng),，只擴(kuò)增鏈球菌 A 組,，與其他病原沒(méi)有 交叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研。

鏈球菌A組PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存,，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置,，不要污染其 他試劑,。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品,，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照）,，一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）,。可以用 10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此 作為 PC,。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲(chóng) DNA 提取 試劑盒兼容,。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照,，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三,、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增,，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效,。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染,。