指環(huán)蟲(chóng)屬通用PCR試劑盒

Dactylogyrus spp.

產(chǎn)品及特點(diǎn)

指環(huán)蟲(chóng)屬指環(huán)蟲(chóng)屬(Dactylogyrus)是扁形動(dòng)物門,、吸蟲(chóng)綱,、單殖亞綱、指 環(huán)蟲(chóng)科的一屬,。本屬種類眾多,，我國(guó)在黑龍江流域,、山東、湖南,、湖北,、四 川、云南,、貴州,、福建、海南島,、兩廣等地均記錄和發(fā)現(xiàn)大量蟲(chóng)種,，目前已有 近 400 種。其種類之鑒別主要依據(jù)中央大鉤的形態(tài)結(jié)構(gòu)及其量度,、聯(lián)結(jié)片與 輔助片的大小形狀,、交接器的形態(tài)及其量度、陰道的結(jié)構(gòu)等等,。此屬在我國(guó) 淡水魚類的單殖吸蟲(chóng)區(qū)系組成中占據(jù)重要的地位,。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開(kāi) 發(fā)的指環(huán)蟲(chóng)屬的通用檢測(cè)試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用,，用戶只需要提供 DNA 模板,。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng),，只擴(kuò)增指環(huán)蟲(chóng)屬,。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研,。

指環(huán)蟲(chóng)屬通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存,，保存期限為一年,。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑,。  

自備試劑 樣品 DNA,。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容,。

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一 個(gè)樣品制備陰性對(duì)照,。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 10000 倍稀釋 液而得,，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用,。 

二,、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照,，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng),。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物,。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效,。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。