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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號(hào)	XY-0240	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度,、更高的擴(kuò)增特異性,。

巨細(xì)胞病毒PCR試劑盒

Cytomegalovirus(CMV)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

巨細(xì)胞病毒（Cytomegalovirus,，CMV）是一種皰疹病毒組 DNA 病毒,。亦稱細(xì)胞包涵體病毒，由于感染的細(xì)胞腫大,，并具有巨大的核內(nèi)包涵體,。巨細(xì) 胞病毒分布廣泛，其他動(dòng)物皆可遭受感染,，引起以生殖泌尿系統(tǒng),，中樞神經(jīng)系統(tǒng)和肝臟疾患為主的各系統(tǒng)感染，從輕微無癥狀感染直到嚴(yán)重缺陷或死亡,。因此對(duì) CMV 的診斷快速診斷具有重要的意義,。本產(chǎn)品就是根據(jù) CMV 保守區(qū)設(shè) 計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR 產(chǎn)品。本試劑盒具有下列特點(diǎn)它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用,，用戶只需要提供病毒 DNA 模板,。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng),，只擴(kuò)增 CMV,，不跟其他病毒發(fā)生交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對(duì)照,，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研。

巨細(xì)胞病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號(hào)	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃蓋）
試劑三	巨細(xì)胞病毒PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	巨細(xì)胞病毒 PCR 陽性對(duì)照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋））
試劑五	天凈沙核酸釋放劑試用裝	20 次（1mL,，綠蓋）
試劑六	使用手冊(cè)	1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存，保存期限為一年,。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置,，不要污染其他試劑。

自備試劑樣品 DNA,。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容,。

2. 如果有 N 個(gè)樣品,，則需要做 N+2 個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照,。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對(duì)照的 10000 倍稀釋液而得,，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水,。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二,、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照,，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng),。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2個(gè) 樣品管	PCR陰性對(duì)照	PCR陽性對(duì)照
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
巨細(xì)胞病毒PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板	各 18 μL
PCR 陰性對(duì)照（水）		18 μL	-
PCR 陽性對(duì)照（巨細(xì)胞病毒 PCR 陽性對(duì)照的 10000 倍稀釋液）	-		18 μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過程	溫度	時(shí)間
預(yù)變性	93℃	2 min
PCR-1 反應(yīng) （10 個(gè)循環(huán)）	93℃	45 sec
PCR-1 反應(yīng) （10 個(gè)循環(huán)）	55℃	60 sec
PCR-2 反應(yīng) （30 個(gè)循環(huán)）	93℃	30 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物,。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效,。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。