蛇形隱孢子蟲PCR試劑盒

Cryptosporidium serpentis

產(chǎn)品及特點(diǎn)

蛇形隱孢子蟲（Cryptosporidium serpentis）感染發(fā)生在爬行動(dòng)物，特 別是蛇,。本病以慢性感染為特征,，伴有肥厚性胃炎,。新生或幼齡動(dòng)物,，對(duì)隱孢 子蟲呈高度易感性,但并非所有感染都引起急性發(fā)病。正常機(jī)體,常呈自限性或亞 臨床感染或無癥狀感染,。但在免疫功能低下或受損患者,，其可迅速繁殖,使病情 惡化,成為死因。因此快速準(zhǔn)確診斷蛇形隱孢子蟲具有重要意義,。為此本公司基 于 PCR 原理開發(fā)了本產(chǎn)品,，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供寄生蟲 DNA 模板,。

2. 根據(jù)蛇形隱孢子蟲保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,，與其他微生物無交叉反應(yīng)

3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研,。

蛇形隱孢子蟲PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存,，保存期限為一年,。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑,。  

自備試劑 樣品 DNA,。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容,。

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取,，包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和一 個(gè)樣品制備陰性對(duì)照,。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對(duì)照的 10000 倍稀釋 液而得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水,。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用,。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照,，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三,、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增,，否則實(shí) 驗(yàn)無效,。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染,。