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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號	XY-0226	應用領域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴增效率,、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性,。

伯氏立克次氏體(柯克斯體)PCR試劑盒

Coxiella burnetii

產品及特點

立克次氏體為革蘭氏陰性菌,，是一類專性寄生于真核細胞內的 G-原核生物。是介于細菌與病毒之間,，而接近于細菌的一類原核生物。一般呈球狀或桿狀,，是專性細胞內寄生物,，主要寄生于節(jié)肢動物，有的會通過蚤,、虱,、蜱、螨傳入人體,、如斑疹傷寒,、戰(zhàn)壕熱。本產品就是根據 PCR 原理開發(fā)的檢測伯氏立克次體產品,，它具有下列特點：

1. 即開即用,，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經過精心優(yōu)化，專一性強,，只擴增伯氏立克次氏體(柯克斯體),，但跟其他微生物無交叉反應。

3. 提供陽性對照,，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,。

6. 本產品只能用于科研。

伯氏立克次氏體(柯克斯體)PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃蓋）
試劑三	伯氏立克次氏體(柯克斯體)PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	伯氏立克次氏體(柯克斯體) PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋））
試劑五	使用手冊	1 份

運輸及保存 低溫運輸,，-20℃保存,，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,，不要污染其他試劑,。

自備試劑樣品 DNA。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場上大多數核酸提取試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品,，則需要做 N+2 個提取,，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液而得,，樣品制備陰性對照是直接用水,。提取結束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二,、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品,，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照，故需要設置 N+4 個反應,。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2個樣品管	PCR陰性對照	PCR陽性對照
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
伯氏立克次氏體(柯克斯體) PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2個樣品DNA模板	各18 μL	-	-
PCR 陰性對照（超純水）	-	18 μL	-
PCR 陰性對照（超純水）	-	-	18 μL

4. 按下表設置 PCR 反應：

過程	溫度	時間
預變性	95℃	5 min
PCR反應（35個循環(huán)）	95℃	30 sec
	54℃	30 sec
	72℃	30 sec
后延伸	72℃	10 min

三,、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物,。本產品提供的 PCR Mix 在擴增結束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽性對照必須有 551bp 大小的條帶出現,，陰性對照必須無任何擴增,，否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染,。